Revista de ciencia y terapia celular
Acceso abierto

abstracto

La nucleolina transporta la Hsp72 a la membrana plasmática preparatoria para su Liberación en el microambiente

Appukuttan NR Pradeep, Alexzander Asea y Punit Kaur

Propósito: Nuestros estudios anteriores demostraron que el estrés térmico induce la liberación de Hsp72 de las células mediante un mecanismo independiente de la vía clásica de transporte de proteínas. Sin embargo, el mecanismo exacto por el cual Hsp72, una proteína sin líder, accede al medio extracelular sigue siendo desconocido. Materiales y métodos: este estudio está diseñado para determinar el mecanismo por el cual se produce el tráfico y la liberación intracelular de Hsp72. Los datos presentados en este estudio sugieren tráfico intracelular de Hsp72 mediante transferencia Western y citometría de flujo. Además, se identificaron proteínas unidas a la membrana desconocidas mediante digestión en gel y LC-MS/MS. Resultados: Demostramos que dentro de los 60 minutos posteriores a la primera exposición de las células al tratamiento de choque térmico, la Hsp72 unida a la membrana plasmática se desprende y se redistribuye en los compartimentos citosólicos. La inhibición del transporte celular activo mediante el tratamiento previo de las células con citocalasina B anuló por completo la redistribución de Hsp72 desde la membrana plasmática hacia el citosol. El entrecruzamiento de proteínas unidas a la membrana plasmática con Hsp72 seguido de análisis de transferencia Western y análisis LC-MS/MS reveló al menos siete socios que interactúan con Hsp72, incluidos nucleolina, Hsp90, gp96, CAP2, TLR2, 4 y 7. Transfección de células con nucleolina-siRNA inhibió completamente la liberación de Hsp72 inducida por el choque térmico y la línea de base. Conclusiones: en conjunto, este estudio demuestra por primera vez que la membrana plasmática actúa como reservorio de Hsp72 y sugiere que la nucleolina desempeña un papel importante en el tráfico y la liberación de Hsp72.