Revista de Proteómica y Bioinformática
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abstracto

Nuevo método de cuantificación específico de isozima para alfa-amilasas en plasma humano reveló la posible inducción de AMY2B por el inhibidor de alfa-amilasa, CS-1036

Mayumi Hayashi, Toshiyuki Kosaka, Mitsunori Kato, Tomohiro Honda, Takuo Washio, Atsushi Yamasaki, Kazuishi Kubota y Akira Shinagawa

En un ensayo clínico de un inhibidor de alfa-amilasa (CS-1036), que fue desarrollado para el tratamiento de pacientes con diabetes tipo 2, la vida media de la concentración plasmática de CS-1036 se prolongó con el aumento del nivel de dosis. Se asumió que la vida media prolongada estaba asociada con la alternancia en el nivel plasmático de cualquiera de las isoenzimas α-amilasa del tratamiento. La α-amilasa humana se clasifica en 3 isoenzimas codificadas por AMY1A, AMY2A y AMY2B. Debido a la alta homología de secuencia entre las isoenzimas de α-amilasa y el bajo nivel plasmático, es extremadamente difícil cuantificar las isoenzimas individuales. Se ha aplicado un enfoque basado en la espectrometría de masas, el Monitoreo de Reacción Múltiple (MRM) usando la estrategia de Cuantificación Absoluta (AQUA), para la cuantificación de proteínas diana, y este enfoque proporciona una alta selectividad y especificidad. Aquí presentamos un nuevo método de cuantificación de isoenzimas de α-amilasa, que es una combinación de purificación de α-amilasa del plasma mediante adsorción por afinidad de almidón y LCMRM-MS. Este método se aplicó a las muestras de plasma del ensayo clínico de CS-1036. Como resultado, solo AMY2B mostró un aumento estadísticamente significativo en función del tiempo. Este resultado sugirió que AMY2B podría estar relacionado con la vida media prolongada de CS-1036.