Clonación y transgénesis
Acceso abierto

abstracto

Tipos de células multipotentes en líneas celulares de fibroblastos primarios utilizados para clonar cerdos mediante transferencia nuclear de células somáticas

Sharon J. Harrison, Luke F.S. Beebe, Ivan Vassiliev, Stephen M. McIlfatrick y Mark B. Nottle

Hemos demostrado previamente que el uso de células madre mesenquimales porcinas (MSC) aisladas de la médula ósea puede aumentar la proporción de células somáticas. embriones de transferencia nuclear (SCNT) que se desarrollan hasta la etapa de blastocisto en comparación con fibroblastos adultos obtenidos del mismo animal. El objetivo del presente estudio fue determinar si las MSC también están presentes en cultivos primarios de fibroblastos adultos que se usan comúnmente para clonar animales vivos. Para ello elegimos un cultivo primario de fibroblastos adultos que previamente habíamos utilizado para clonar cerdos. Los clones de células individuales se aislaron utilizando placas de baja densidad. Después de siete días de cultivo, el 63% de las colonias mostraban una morfología típica de fibroblastos, mientras que el resto tenía un aspecto similar al de un adoquín. Dos de los 57 clones que mostraban morfología de fibroblastos se diferenciaron en adipocitos pero no en condrocitos ni en osteocitos (clones unipotentes). Tres de los 33 clones similares a adoquines se diferenciaron en condrocitos únicamente, mientras que 3 se diferenciaron en adipocitos y condrocitos pero no en osteocitos (clones bipotentes). A continuación, se usó uno de los clones similares a adoquines bipotentes para SCNT y desarrollo in vitro en comparación con un clon similar a fibroblastos que no se diferenció. Ambos tipos de células produjeron blastocistos a tasas similares. En conclusión, hemos identificado tipos de células unipotentes y bipotentes en cultivos primarios de fibroblastos adultos utilizados previamente para clonar lechones vivos.