Revista de Inmunología Clínica y Celular
Acceso abierto

abstracto

miR-24 regula la polarización y la plasticidad de los macrófagos

Jezrom B. Fordham, Afsar R. Naqvi y Salvador Nares

Objetivo: los microARN (miARN) son reguladores ubicuos de la biología y la inmunidad humanas. Previamente, hemos demostrado un papel inhibidor de miR-24 en la fagocitosis de biopartículas de Escherichia coli y Staphylococcus aureus y la inducción de la secreción de citoquinas en respuesta a lipopolisacáridos (LPS) del mismo origen; Además, hemos identificado respuestas de miARN divergentes y convergentes a LPS de los patógenos periodontopáticos Aggregatibacter actinomycetemcomitams (Aa) y Porphyromonas gingivalis (Pg), y hemos revelado que el extracto de humo de cigarrillo es un agente ambiental. modificador de la estructura de Pg LPS (Pg CSE) que afecta las respuestas de miARN de macrófagos. Este estudio fue diseñado para investigar el papel de miR-24 en la polarización y plasticidad de los macrófagos.

Métodos: Los macrófagos humanos primarios se diferenciaron de monocitos CD14+ aislados de células mononucleares de sangre periférica (PBMC) mediante selección positiva de MACS y se transfectaron con imitadores de miR-24 miARN, inhibidores o imitadores de control negativo; seguido de estimulación con citocinas y/o LPS en diversas condiciones que representan etapas clave de la activación de los macrófagos. La activación y polarización de los macrófagos se evaluó mediante ensayos de producción de citoquinas (ELISA) y expresión de proteínas (citometría de flujo, inmunotransferencia). La expresión de MiR-24 se evaluó mediante RT-PCR.

Resultados: la estimulación de macrófagos con LPS de origen Aa, Pg y Pg CSE dio como resultado niveles disímiles de expresión de citoquinas y expresión diferencial de miR-24. La sobreexpresión de miR-24 inhibió la secreción de citoquinas en respuesta a LPS. El cebado de macrófagos con interferón gamma (IFN-γ) no superó este efecto inhibidor, pero la activación clásica de macrófagos con IFN-γ más TNF-α, TNF-β o IL-17, moduló el patrón de supresión mediada por miR-24 de una manera específica de citoquinas. La sobreexpresión de miR-24 mejoró la regulación positiva de CD206 durante la activación de macrófagos alternativos e inhibió su regulación negativa en la transición de macrófagos de estados de activación alternativos a clásicos. La sobreexpresión de miR-24 resultó en una expresión reducida de la subunidad p110 delta (p110δ) de la clase 1A PI 3-quinasa.

Conclusión: Las modificaciones específicas del medio ambiente y del patógeno en LPS alteran la expresión de citoquinas y miR-24 en macrófagos humanos. MiR-24 es un regulador negativo de la activación clásica de macrófagos por LPS y promueve una activación alternativa en condiciones de polarización y plasticidad. La inhibición mediada por MiR-24 de la secreción de citocinas inducida por LPS depende del estado de activación de los macrófagos en el punto de estimulación, y esto puede deberse al grado en que p110δ participa en la vía o vías de señalización intracelular que transducen la ligadura del receptor en la inducción de citoquinas. Si bien se observaron diferencias importantes en el efecto de miR-24 sobre los macrófagos, estos datos indican que la sobreexpresión de miR-24 sería predominantemente antiinflamatoria.