Avances en Ingeniería del Automóvil

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Acceso abierto

ISSN: 2167-7670

abstracto

Microdevice immunoassay with conjugated magnetic nanoparticles for rapid anti-cyclic citrullinated peptide (anti-CCP) detection

Kenia Chávez Ramos, María del Pilar Cañizares Macías

La inmunotoxina IgG antipéptido citrulinado cíclico (anti-CCP) se produce como una respuesta inmunitaria en presencia de péptidos modificados postraduccionales conocidos como péptidos citrulinados cíclicos (CCP). Los anti-CCP se han considerado como biomarcadores específicos para el análisis de la artritis reumatoide(AR), y debido a su alta especificidad, es posible realizar un diagnóstico diferencial con otras enfermedades reumáticas. Estas inmunotoxinas pueden detectarse en etapas tempranas de la AR e incluso hasta 10 años antes de presentar los primeros síntomas de la enfermedad abriendo una ventana de oportunidad para un tratamiento oportuno. El método más utilizado para la detección de anti-CCP es un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA). A pesar de su gran sensibilidad, ELISA se considera un ensayo que requiere mucho tiempo. En este trabajo, se desarrolló y probó en plasma un microdispositivo de canal recto simple y nanopartículas magnéticas conjugadas con CCP (MNPs-CCP) como soporte sólido para cuantificar anti-CCP. Para el análisis espectrofotométrico se utilizó un microdispositivo con un diseño de celda Z de flujo óptico acoplado con fibras ópticas. El inmunoensayo de microdispositivo, empleando solo 6 ?L de muestra y reactivos, fue casi nueve veces más rápido que un kit comercial ELISA anti-CCP, pero se obtuvieron resultados equivalentes. El rango de identificación fue de 0,70-2000 U mL-1 con una restricción de descubrimiento de 0,70 U mL-1 (16 veces más delicado que el paquete ELISA pensado). El inmunoensayo de microdispositivo, con MNPs-CCP formados, es una técnica sencilla para la evaluación de CCP, siendo menos costosa, más rápida y más delicada que el paquete ELISA. Progresivamente, las medidas para la localización de la inmunotoxina peptídica citrulinada (ACPA) hostil a la citrulinada se utilizan en la determinación de la AR. Esta auditoría resume la premisa biológica y la mejora de los exámenes de ACPA, las medidas accesibles de ACPA y sus atributos de presentación, y las propiedades analíticas de ACPA solo y en comparación con el factor reumatoide (RF) en la AR temprana. También examinamos las relaciones, la exactitud, los costos y la rentabilidad, la accesibilidad, la solidez y la reproducibilidad de los exámenes disponibles. En conjunto, la información muestra que ACPA tiene una particularidad más alta que RF para AR temprana, gran legitimidad profética, alta afectación, clara adecuación de costos y gran fuerza y ​​reproducibilidad. Dadas sus excelentes cualidades de ejecución y su creciente accesibilidad, ACPA se perfila como la prueba individual más valiosa para el análisis de AR. La determinación de la inflamación articular reumatoide (AR) temprana ha dependido de medidas clínicas, que incluyen la historia y los descubrimientos de pruebas reales, las instalaciones de investigación y los resultados radiográficos. El daño irreversible ocurre tan a menudo como sea posible desde el principio en la AR. Con pruebas cada vez mayores que respaldan el análisis temprano y el tratamiento contundente para prevenir daños e incapacidad, hay que mejorar la identificación y detección de AR temprana. Desde no hace mucho tiempo, las medidas que distinguen el factor reumatoideo (FR), inmunotoxina coordinada contra la parte Fc del átomo de inmunoglobulina G (IgG), han sido las pruebas serológicas fundamentales para el hallazgo de la AR. Las pruebas contra el agente que actúa en contra del péptido citrulinado (ACPA), creadas y popularizadas en la década anterior, se están utilizando actualmente clínicamente. Dado que los ACPA están presentes antes de la aparición de los síntomas de la AR y predicen el desarrollo de la AR, son una prueba de diagnóstico valiosa en las primeras etapas del curso de la enfermedad. Esta revisión sintetiza los datos actualmente disponibles sobre las propiedades diagnósticas de RF y ACPA para el diagnóstico de AR temprana. Nos enfocamos en ACPA debido a su desarrollo reciente y su papel potencial en la identificación mejorada de la AR temprana e indiferenciada.marketinglos ensayos, y la información y opiniones obtenidas de expertos en la materia. Hemos incluido información sobre la base biológica y el desarrollo de los ensayos ACPA, los ensayos disponibles y los datos relacionados con las características de rendimiento de los ensayos, en particular los publicados en revistas revisadas por pares, pero también los publicados por los fabricantes. Se revisan las propiedades diagnósticas de estas pruebas, incluidas, entre otras, la sensibilidad, la especificidad y los valores predictivos positivos y negativos. En 1940, Waaler observó que la mezcla de suero de un paciente con AR con eritrocitos de oveja sensibilizados con IgG inhibía la hemólisis, pero provocaba la aglutinación celular. Rose y sus colegas informaron más tarde que los sueros de AR aglutinaron eritrocitos de oveja recubiertos con anticuerpos de conejo anti-eritrocitos de oveja más que los sueros de individuos sanos. Estos hallazgos formaron la base del primer ensayo de AR, la prueba de Waaler-Rose. Los ensayos de RF detectan con mayor frecuencia anticuerpos IgM dirigidos contra la porción Fc de la molécula de IgG. La prueba de aglutinación mide solo RF IgM y sigue siendo el ensayo más utilizado. Los ensayos de aglutinación se informan como títulos o unidades. Los límites para la positividad los determinan los fabricantes y se basan en los resultados de los pacientes con AR en comparación con los controles sanos. Los ensayos de aglutinación tienen sensibilidades para AR r del 70 al 85 % y especificidades que oscilan entre el 40 y el 90 %, ya que puede ocurrir aglutinación en individuos sin AR. Se han desarrollado otros ensayos para RF, incluidos ensayos inmunoabsorbentes ligados a enzimas (ELISA), ensayos radioinmunes (RIA) y técnicas de láser o de nefelometría de velocidad. También están disponibles ensayos para la detección de IgA e IgG RF. La sensibilidad de la RF para el diagnóstico de AR mediante estas técnicas es del 50-90% y la especificidad es del 50-95%. Estos amplios rangos reflejan diferencias en las poblaciones analizadas. Los estudios que comparan directamente las técnicas de detección de RF en cohortes de pacientes con AR establecida, controles sanos y pacientes con enfermedad articular no inflamatoria han informado que el rendimiento de la prueba de aglutinación de látex es similar al de la nefelometría y los ensayos radioinmunes. En un metanálisis de 50 estudios de ensayos de RF de 1998 a 2005, los índices de probabilidad agrupados (dependiendo tanto de la sensibilidad como de la especificidad) fueron cuantitativamente similares para los ensayos de RF de IgM, IgA e IgG, y para usar un título de RF más alto versus más bajo para positividad Los resultados de RF falsos positivos suelen ocurrir en el contexto de infecciones crónicas, neoplasias malignas y otras enfermedades reumáticas. El FR se detecta en el suero del 1-4% de personas jóvenes sanas y en un mayor porcentaje de personas mayores sin AR. Sin embargo, el ensayo de RF está ampliamente disponible, es relativamente económico y lo entienden tanto los médicos de atención primaria como los médicos.especialistas en artritis . En 1964, Nienhuis y sus colegas describieron un autoanticuerpo al que llamaron factor antiperinuclear. Detectado por prueba de inmunofluorescencia indirecta en células de la mucosa bucal humana, antígeno reconocido del factor anti-perinuclear presente en los gránulos de queratohialina que rodean el núcleo. El factor antiperinuclear estuvo presente hasta en el 90 % de los pacientes con AR establecida, con una especificidad del 73-99 %. Young y sus colegas detectaron más tarde anticuerpos anti-queratina usando inmunofluorescencia indirecta en secciones de esófago de rata llorando.

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