Investigación inmunológica
Acceso abierto

abstracto

Mecanismo de recuperación de endotoxina baja causado por una solución que contiene un agente quelante y un detergente

Masakazu Tsuchiya

El mecanismo de recuperación de endotoxina baja (LER) se investigó al observar el cambio en el tamaño de las partículas y la actividad de la endotoxina en soluciones de LER que contenían citrato de sodio y polisorbato 20. Curiosamente, los agregados de endotoxina no se dispersaron para ser partículas más pequeñas en condiciones de LER según el cese de la actividad. Esta observación fue diferente de las predicciones previas del mecanismo. Los agregados de endotoxina se observaron mediante dispersión de luz dinámica y la actividad se midió mediante la prueba de lisado de amebocitos de Limulus. Siempre se observaron partículas con tamaños similares a los agregados de endotoxina a pesar de la diferente actividad remanente de la endotoxina enriquecida. Esta observación difería de los mecanismos propuestos previamente para LER en que los agregados de endotoxinas dispersas eran de menor tamaño. Con base en los hallazgos, se propone un nuevo mecanismo de LER. La endotoxina purificada forma estructuras cúbicas no laminares en el agua y los agregados de endotoxina se refuerzan con cationes divalentes. Cuando se agrega endotoxina purificada a las soluciones de LER, el agente quelante elimina los cationes divalentes de la capa externa de endotoxina y la pérdida de cationes divalentes debilita la capa externa de los agregados de endotoxina. La estructura de agregación de endotoxina se mantiene a baja temperatura, pero las moléculas de endotoxina en la superficie de los agregados de endotoxina se reemplazan gradualmente con moléculas de detergente a temperatura más alta. Este reemplazo reduce el área superficial de la endotoxina y provoca una reducción de la actividad de los agregados de endotoxina. Los tamaños aparentes de los agregados no cambian después del reemplazo.