Biología celular y del desarrollo
Acceso abierto
ISSN: 2168-9296
ISSN: 2168-9296
Brijesh Gupta y Manchikatla Venkat Rajam
El sistema de cotransformación que usa una mezcla de dos cultivos de Agrobacterium, uno que contiene manitol-1-fosfato deshidrogenasa bacteriana (mtlD) como gen de interés, mientras que el otro, que albergaba el gen marcador de neomicina fosfotransferasa (nptII) para la selección, se utilizó con éxito para desarrollar transgénicos seleccionables libres de marcadores de tomate con acumulación de manitol modificada, para mejorar la tolerancia frente a múltiples estreses abióticos. Hemos conseguido una alta frecuencia de cotransformación (hasta un 24 %) y una frecuencia de segregación (hasta un 22-24 %) para la obtención de transgénicos libres de marcadores. Las plantas de tomate transgénicas libres de marcadores dieron como resultado la acumulación de manitol, como lo demuestra el análisis de HPLC, que conduce a una protección sustancial del vigor de las plantas bajo múltiples condiciones de estrés abiótico, como alta salinidad (hasta 200 mM NaCl), sequía (hasta 200 mM NaCl). PEG al 15 %) y toxicidad por metales pesados (hasta 2 mM de CdCl2). Bajo estrés, los transgénicos se desempeñaron bien en comparación con el tipo salvaje (WT), con un alto porcentaje de germinación de semillas y crecimiento de plántulas tanto in vitro como in vivo. También se desempeñaron mejor que WT, en términos de alto contenido de clorofila y otros parámetros fotosintéticos, como la relación Fv/Fm, la tasa de transporte de electrones (ETR), el rendimiento fotosintético y el bajo enfriamiento no fotoquímico (NPQ). Por lo tanto, un alto nivel de manitol no solo aumenta el valor nutricional de la fruta, sino que también mejora la tolerancia de las plantas de tomate transgénicas al aumentar su eficiencia fisiológica y fotosintética, lo que sugiere que las alteraciones de carbohidratos producidas por la biosíntesis de manitol pueden estar relacionadas con la respuesta al estrés.