Enfermedades micobacterianas
Acceso abierto

abstracto

Protocolo MALDI-TOF para la identificación de M. tuberculosis Identificación mejorada mediante espectrometría de masas MALDI-TOF de Mycobacterium tuberculosis mediante el uso de un protocolo de disrupción celular

Bacanelli GM*, Araujo FR, Verbisck NV

La espectrometría de masas con desorción láser asistida por matriz y tiempo de vuelo (MALDI-TOF MS) se ha utilizado para la identificación de Mycobacterium spp. debido a su velocidad, confiabilidad, relación costo-beneficio y alta eficiencia. Sin embargo, la pared celular de las micobacterias es rica en lípidos, lo que dificulta la obtención de proteínas para su análisis mediante MALDI-TOF MS. En este estudio, se compararon dos protocolos de extracción de proteínas: el MycoEx, recomendado por el fabricante del instrumento MALDI-TOF Bruker Daltonics y el protocolo MycoLyser descrito aquí, que utilizó el instrumento MagNA Lyser para la ruptura celular. La extracción de proteínas con los dos protocolos se realizó utilizando la cepa virulenta M. tuberculosis H37Rv (NCBI NC_000962) y se compararon los resultados. El protocolo MycoLyser permitió una mejor identificación de M. tuberculosis con Biotyper , ya que las puntuaciones obtenidas con este protocolo fueron en su mayoría ˃1.800. La precisión de identificación fue del 38,8% (A), 44,5% (B), 16,7% (C) para MycoLyser y del 0% (A), 16,7% (B), 83,3% (C) para MycoEx. En vista de estos resultados, es evidente que el nuevo protocolo MycoLyser para la extracción de proteínas micobacterianas permite mejorar la eficacia del método MALDI-TOF MS para la identificación de M. tuberculosis .