Journal of Fertilization: In Vitro - IVF-Worldwide, Reproductive Medicine, Genetics & Stem Cell Biol
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abstracto

Aislamiento magnético y caracterización de células madre putativas (Psc) de ovario porcino: un estudio in vitro

Malgorzata Duda

De acuerdo con la hipótesis dominante, la fuente potencial de tumorigénesis podría ser las células madre cancerosas (CSC) resultantes de la acumulación de mutaciones en otras tipos de células madre (SC). Por lo tanto, decidimos identificar y caracterizar las células madre somáticas comúnmente llamadas células madre putativas (PSC) en el ovario posnatal porcino. Para aislar las PSC de ovario, se utilizó un anticuerpo contra SSEA-4 conjugado con perlas magnéticas. Las PSC se cultivaron durante 7 días. Durante el cultivo se han observado cuerpos embrioides que surgen espontáneamente. Tal comportamiento en condiciones de cultivo es característico de las células madre. Mediante inmunofluorescencia mostramos la localización citoplasmática de los marcadores de pluripotencialidad Oct 3/4 y Sox-2, proteínas responsables de mantener las células en un estado indiferenciado. Usando inmunocitoquímica, mostramos la localización transmembrana y citoplasmática del receptor c-Kit y GDF-9, proteína asociada con el inicio de la diferenciación celular en el proceso de foliculogénesis. También demostramos una ubicación citoplasmática y perinuclear de la proteína Ki-67 asociada con la división celular. El método de PCR reveló la presencia de marcadores de células madre como c-Kit, GDF-9 y el marcador de proliferación Ki-67 al nivel de la transcripción en las células madre putativas (PSC). Además, mediante el análisis de transferencia Western, también confirmamos la presencia de marcadores que incluyen c-Kit, GDF-9, Oct-3/4, Sox-2 y Ki-67 en estas células PSC. Los resultados obtenidos permiten suponer que las células madre están realmente presentes en el ovario porcino.