Revista de Nanomedicina y Descubrimiento Bioterapéutico
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abstracto

Liposomas activados por luz para mejorar el escape endo/lisosomal y el silenciamiento génico en células PC12

wei deng

Los liposomas son un sistema eficaz de administración de genes/fármacos, ampliamente utilizado en aplicaciones biomédicas, incluidas la terapia génica y la quimioterapia. Aquí diseñamos un liposoma fotosensible (lipVP) cargado con un fotosensibilizador verteporfina (VP). Este fotosensibilizador está clínicamente aprobado para la terapia fotodinámica (PDT). LipVP se empleó como transportador de ADN para la desactivación del gen del receptor 1 (PAC1R) del polipéptido activador de la adenilil ciclasa hipofisaria (PACAP) en células PC12. Esto se ha hecho mediante la incorporación de oligonucleótidos antisentido PAC1R dentro de la cavidad lipVP. Las células que habían absorbido el lipVP se expusieron a la luz de una fuente de luz ultravioleta. Como resultado de esta exposición, se generaron especies reactivas de oxígeno (ROS) a partir de VP, lo que desestabilizó las membranas endo/lisosomales y mejoró la liberación liposomal de ADN antisentido en el citoplasma. El escape endo/lisosomal de ADN se documentó en diferentes momentos en función del análisis cuantitativo de la colocalización entre el ADN marcado con fluorescencia y los endo/lisosomas. Se encontró que los oligonucleótidos antisentido liberados silenciaban el ARNm de PAC1R. La eficacia de este silenciamiento génico fotoinducido se demostró mediante una disminución del 74 ± 5 % en la intensidad de fluorescencia de PAC1R. Después de la transferencia de ADN inducida por la luz a las células, se observó la diferenciación celular con la exposición a dos tipos de péptidos PACAP para determinar el cambio fenotípico celular después de la eliminación del gen PAC1R.