Revista de glucómica y lipidómica
Acceso abierto

abstracto

El enfoque de proteómica cuantitativa libre de etiquetas revela la pleiotropía del factor inhibidor de la leucemia de búfalo (BuLIF) en células COS-1

Sudarshan Kumar

El factor inhibidor de la leucemia (LIF) es una molécula pleotrópica que realiza diversas funciones de manera dependiente del contexto. El LIF bovino (BuLIF) es un componente de medios esencial en el cultivo de células madre in vitro y también se considera esencial en las primeras etapas del embarazo. Sin embargo, se desconoce el mecanismo molecular exacto detrás de las diversas acciones de esta molécula, excepto las vías canónicas mediadas por stat3 en la pluripotencialidad de las células madre. Producimos una línea celular COS-1_BuLIF transfectada de forma estable que expresaba una gran cantidad de LIF en los medios. La integración de BuLIF en el genoma se confirmó mediante PCR seguida de secuenciación. Descubrimos que LIF induce la formación de una estructura similar a una cúpula, lo que es indicativo de la acción de BuLIF a través de la vía stat3. Además, se purificó rBuLIF puro a partir de esta línea celular que resultó ser una proteína de 58,99 kDa y 48,9 kDa con y sin glicosilación respectivamente, lo que se confirmó mediante transferencia Western y nLC-MS/MS. El ensayo de lapso de tiempo y dependiente de la concentración de LIF purificado mostró una inhibición máxima a las 72 horas y la mitad de la concentración efectiva máxima (CE50) de 0,0555 ng/ml, lo que corresponde a una actividad específica de >1,6