Revista de Farmacia Aplicada
Acceso abierto

abstracto

AISLAMIENTO, CINÉTICA Y ACTIVIDAD ANTILEUCÉMICA IN VITRO DE LA LGLUTAMINASA DE CAPSICUM ANNUM

Mohannad Idress, Mohammed Salim, Asia El-Hassan

Este estudio tiene como objetivo explorar el potencial de desarrollar L-glutaminasa natural aislada de chiles verdes como fármaco antileucémico que se dirige selectivamente al metabolismo de las células cancerosas a diferencia de otros quimioterapéuticos no selectivos. Esto se hizo mediante la determinación de su actividad específica y condición óptima para la actividad de L-glutaminasa seguida de purificación parcial y ensayo de citotoxicidad in vitro. La actividad de Lglutaminasa se midió en el extracto acuoso de frutas por el método de Nesslerización después de homogeneización en nitrógeno líquido y extracción con tampón de borato de sodio 0,05 M (pH 8,5). Los resultados mostraron que la actividad de Lglutaminasa por miligramo de proteína total fue de 18,7 U/mg. Se estudiaron las condiciones óptimas para la actividad catalítica de la L-glutaminasa cruda extraída de frutos de chile. Los resultados mostraron que se logró la actividad máxima de L-glutaminasa cuando la enzima se incubó con 250 mM de L-glutamina a 37 °C durante 30 minutos en presencia de solución salina tamponada con fosfato a pH 7,2. La velocidad máxima (Vmax) y la constante de afinidad (Km) de la L-gutaminasa fueron 14,1 mM y 90,2 mM, respectivamente. La L-glutaminasa bruta se purificó por salificación utilizando siete concentraciones diferentes de sulfato de amonio que oscilaban entre el 20 % y el 80 % de saturación. La actividad específica de la L-glutaminasa purificada aumentó de 18,7 a 98,5 U/mg cuando se salinizó en solución de sulfato de amonio al 50%. Este resultado indicó la alta eficiencia de la precipitación con sulfato de amonio como técnica de purificación. La evaluación de la propiedad antileucémica se realizó comparando la citotoxicidad de la L-glutaminasa con la doxorrubicina y la combinación de ambas frente a la línea celular THP-1 mediante el ensayo MTT. Los resultados mostraron una actividad anticancerígena significativa con un porcentaje de inhibición del 72,75 % en el caso de la combinación de la enzima con doxorrubicina en comparación con la enzima sola (60,28 %). Estos hallazgos concluyeron que la L-glutaminasa de los chiles verdes podría desarrollarse como agente antileucémico debido a su alto contenido en chiles, facilidad de purificación y citotoxicidad significativa contra las células de leucemia monocítica humana.