Clonación y transgénesis
Acceso abierto

abstracto

Aislamiento y caracterización del gen de inositol tetrafosfato 1-quinasa (AhITPK1) e inositol 1,4,5-tris-fosfato quinasa (AhIPK2) en maní

Ajay BC, Bera SK, Devaiah K, James O, Violetka T y Anthony A

En el estudio actual, clones parciales de ADNc de inositol tetrafosfato 1-quinasa (ITPK1) e inositol 1,4,5-trifosfato quinasa/inositol polifosfato multiquinasa (IPK2) se aislaron del embrión mediante RT-PCR y se designaron como isoformas AhITPK1 y AhIPK2. del gen La secuencia parcial de ADNc de los genes AhITPK1 y AhIPK2 tiene un marco de lectura abierto (ORF) de 1146 y 891 pb respectivamente y mostró una gran similitud con otros genes de plantas. AhITPK1 compartió alta homología con Aradu. Q95MC de Arachis duranensis, tenía un solo exón sin intrones y pertenecía a la familia de proteínas ATP-grasp. AhIPK2 compartía una gran similitud con Aradu.24V9G de A. duranensis y contenía tres exones con 5’ y 3’ UTR’s a ambos lados. A diferencia de otros genes IPK2, AhIPK2 poseía dominios conservados como PxxxDxKxG y [L/M][I/V]D[F/L][A/G][H/K]. El análisis filogenético agrupó AhITPK1 con A. duranensis, A. ipinensis y Oryza brachyantha en un grupo, mientras que AhIPK2 se agrupó junto con Cucumis melo y C. sativus. Evolutivamente, AhITPK1 y AhIPK2 eran genéticamente distintos de otros géneros de plantas. Además, el análisis de PCR en tiempo real reveló una alta expresión de los genes AhITPK1 y AhIPK2 en el embrión de maní y el botón floral. Por primera vez se identificaron los genes AhITPK1 (KR778986) y AhIPK2 (KR778988) pertenecientes a la ruta del ácido fítico de Arachis hypogaea y se caracterizó el patrón de expresión de estas dos isoformas en diferentes tejidos. Se encontró que estos genes eran abundantes en el botón floral y el embrión. Los resultados sugieren que el desarrollo del embrión influye significativamente en la expresión de las dos isoformas de AhIPK en el maní. Evolutivamente, se descubrió que eran distintos de sus especies parentales. Este estudio es un paso importante hacia la comprensión del papel de estas dos isoformas de AhIPK en la síntesis de ácido fítico. Sin embargo, se justifica la investigación futura que involucre la caracterización funcional basada en ARNi para establecer su vínculo con el desarrollo embrionario en maní.