Virología y Micología
Acceso abierto

abstracto

Identification of a small molecule that primes the type I interferon response to cytosolic DNA

samira khiar

La reacción de interferón de tipo I asume un papel urgente en la protección contra los agentes irresistibles y los tumores, y las metodologías útiles prometedoras dependen de pequeños átomos destinados a respaldar este sistema. Para reconocer tales mezclas, desarrollamos una prueba de detección de alto rendimiento basada en células HEK-293.luciferasa comunicante fuertemente influenciada por componentes de reacción vigorizados por interferón (ISRE). Se evaluó una biblioteca única de 10 000 mezclas fabricadas y distinguimos una progresión de mezclas de 1H-bencimidazol-4-carboxamida que iniciaron la agrupación de anunciantes ISRE, genes estimulados por interferón (ISG) de células explícitas y la fosforilación del factor regulador de interferón (IRF) 3. El alistamiento de ISRE por parte de ChX710, un individuo prototípico de este arreglo sintético, estaba sujeto al conector MAVS e IRF1, pero era IRF3 autónomo. A pesar del hecho de que no podía desencadenar la descarga de IFN de tipo I fundamentalmente, ChX710 preparó eficazmente la reacción celular al ADN plasmídico transfectado según lo observado por los intensos impactos sinérgicos en IFN-? niveles de emisión y articulación ISG. Esta reacción telefónica estuvo sujeta a STING, un conector clave asociado con la detección de ADN citosólico y promulgación resistente por diferentes patógenos, señales de estrés y tumorigénesis. Nuestros resultados muestran que la reacción celular al ADN citosólico se puede ayudar con una pequeña partícula, y se habla de posibles aplicaciones en tratamientos antimicrobianos y de crecimiento maligno.

Los instrumentos de barrera contra operadores irresistibles y tumores dependen básicamente de la reacción del interferón tipo I (IFN). Este marco depende de la aceptación de ambas citoquinas IFN-α/βy genes estimulados por interferón (ISG), que se suman al inicio de la invulnerabilidad intrínseca y versátil. La reacción de IFN de tipo I se activa mediante el reconocimiento de patrones moleculares asociados a patógenos (PAMP) explícitos y patrones moleculares asociados a daños (DAMP). Los PAMP se relacionan con una disposición restringida de estructuras atómicas, incluidas proteínas, azúcares, lípidos o ácidos nucleicos, que están explícitamente relacionados con operadores irresistibles, aunque los DAMP comienzan a partir de células dañadas o muertas. Varias clases de receptores celulares, conocidos como PRR por "Receptores de reconocimiento de ejemplo", están asociados con el reconocimiento de PAMP y DAMP. Los PRR clave asociados con la aceptación de la reacción de IFN tipo I son los receptores tipo 3, 7, 8 o 9 (TLR3/7/8/9), los receptores tipo RIG-I (RLR) que envían señales a través del conector MAVS, y sensores de ADN citosólico, por ejemplo, cGAS o IFI16 que emiten señales utilizando STING como etapa. Estos diversos receptores básicamente perciben los ácidos nucleicos con aspectos destacados extraños o ejemplos de limitación, por ejemplo, 5′-trifosfatoÁtomos de ARN para RIG-I o ADN citosólico para la vía de señalización de cGAS/STING. Cuando se conectan por sus ligandos, promulgan factores reguladores de interferón (IRF3, IRF7 o IRF1) para incitar la declaración de citoquinas IFN tipo I (IFN-α y β) junto con un conjunto de cualidades anteriormente aludidas típicamente como ISG1 tempranos. Más tarde, el IFN-α/β emitido se une a su receptor de película en el exterior de las células vecinas y creadoras de IFN para mejorar la reacción de resistencia. El IFN-α/β autorizado para su receptor activa los factores de traducción STAT1 y STAT2 y una segunda afluencia de ISG para controlar adicionalmente la enfermedad o eliminar las células tumorales. Se evalúa que el genoma humano contiene muchos ISG que, por ejemplo, interfieren con la replicación de infecciones, agudizan tumorescélulas a la apoptosis, o animar la reacción insensible versátil. Descifrar los complejos componentes que controlan la reacción del IFN de tipo I es básico para el avance de tratamientos creativos que animan el sistema insensible contra infecciones o tumores, sin provocar la sobreactivación de este sistema que puede ser perjudicial para el paciente.

La misión de las mezclas pequeñas que activan la reacción de interferón de tipo I es un campo de investigación extraordinaria en los centros de investigación académica y las organizaciones farmacéuticas, y algunas partículas ya se muestran o se encuentran en preliminares clínicos de última generación. Las mezclas de la familia de las imidazoquinolinas, como el resiquimod (R848) y el imiquimod (R837), son notables inductores de la reacción de IFN que dificultan TLR7, TLR8 o ambos. Los subordinados de pirimidina y purina también se han descrito como ligandos de TLR7/8, y actualmente se están desarrollando. Más recientemente, se ha indicado que la 5,6-di-metilxantenona-4-corrosiva ácida (DMXAA), la 10-carboximetil-9-acridanona (CMA) y la flavona corrosiva ácida (FAA), que tienen todos Se sabe desde hace mucho tiempo que provoca la reacción de IFN de tipo I en ratones, pero no en humanos, son ligandos explícitos de STING de ratón. STING es una proteína indicadora que es iniciada por varias proteínas citoplasmáticas involucradas en la detección de ADN, e incluso se propuso vincular el ADN legítimamente, pero al mismo tiempo es un receptor para 2′,3′-cGAMP, un dinucleótido cíclico endógeno administrado por el catalizador celular cGAS a la vista del ADN citosólico. DMXAA, CMA y FAA vinculan explícitamente STING de ratón en el bolsillo de restricción 2′,3′-cGAMP, activando así la activación de IRF3 y el alistamiento de ISG. En vista de estos resultados, algunos grupos de investigación están buscando pequeñas mezclas equipadas para restringir STING humano. Finalmente, también se anunciaron mezclas que limitan directamente el receptor de IFN de tipo I para instigar a los ISG. e incluso se propuso unir el ADN legítimamente, pero al mismo tiempo es un receptor para 2',3'-cGAMP, un dinucleótido cíclico endógeno administrado por el catalizador celular cGAS a la vista del ADN citosólico. DMXAA, CMA y FAA vinculan explícitamente STING de ratón en el bolsillo de restricción 2′,3′-cGAMP, activando así la activación de IRF3 y el alistamiento de ISG. En vista de estos resultados, algunos grupos de investigación están buscando pequeñas mezclas equipadas para restringir STING humano. Finalmente, también se anunciaron mezclas que limitan directamente el receptor de IFN de tipo I para instigar a los ISG. e incluso se propuso unir el ADN legítimamente, pero al mismo tiempo es un receptor para 2',3'-cGAMP, un dinucleótido cíclico endógeno administrado por el catalizador celular cGAS a la vista del ADN citosólico. DMXAA, CMA y FAA vinculan explícitamente STING de ratón en el bolsillo de restricción 2′,3′-cGAMP, activando así la activación de IRF3 y el alistamiento de ISG. En vista de estos resultados, algunos grupos de investigación están buscando pequeñas mezclas equipadas para restringir STING humano. Finalmente, también se anunciaron mezclas que limitan directamente el receptor de IFN de tipo I para instigar a los ISG. en este sentido, activando la activación de IRF3 y el alistamiento de ISG. En vista de estos resultados, algunos grupos de investigación están buscando pequeñas mezclas equipadas para restringir STING humano. Finalmente, también se anunciaron mezclas que limitan directamente el receptor de IFN de tipo I para instigar a los ISG. en este sentido, activando la activación de IRF3 y el alistamiento de ISG. En vista de estos resultados, algunos grupos de investigación están buscando pequeñas mezclas equipadas para restringir STING humano. Finalmente, también se anunciaron mezclas que limitan directamente el receptor de IFN de tipo I para instigar a los ISG.

Recientemente mostramos una medida celular de alto rendimiento que se puede utilizar para examinar bibliotecas de compuestos y distinguir átomos que inician ISG. Este marco de detección depende de una línea celular HEK-293 que comunica luciferasa nivelada de cinco elementos de respuesta estimulados por interferón (ISRE). Estos componentes administrativos están disponibles en los anunciantes de todos los ISG para garantizar una actuación de calidad en el inicio de STAT1/2, pero también contienen locales restrictivos para IRF1/3/7, que son promulgados legítimamente por los PRR. La acción de la luciferasa se utiliza tal como se examina para elegir los átomos que activan los ISG. Dado que las células HEK-293no comunican grados elevados de TLR3, 7, 8 o 9, esta prueba elige básicamente ligandos de receptores de IFN tipo I, activadores de vías STING o RLR, o vías aún no identificadas. Por ejemplo, recientemente nos relacionamos con este estudio de diversas familias de compuestos que se enfocan nuevamente en la biosíntesis de pirimidina a través de la restricción de la dihidroorotato deshidrogenasa (DHODH), el cuarto químico de esta vía metabólica. Esto nos llevó a desarrollar una conexión utilitaria entre la reacción del interferón y el estrés celular provocado por las piscinas agotadoras de pirimidinas.