Revista de Antivirales y Antirretrovirales
Acceso abierto
ISSN: 1948-5964
ISSN: 1948-5964
Tao Duan, Monique Ferguson, Lintian Yuan, Fangling Xu y Guangyu Li
La progresión de la enfermedad con la infección por el virus del Nilo Occidental (WNV) en humanos conduce a meningitis o encefalitis y puede causar la muerte, particularmente entre personas de edad avanzada e inmunocomprometidas. La inmunidad pasiva usando inmunoglobulinas ha demostrado eficacia en el tratamiento de algunos pacientes con infección por WNV, lo que hace que el desarrollo de anticuerpos humanos anti-WNV sea significativo. El objetivo de este estudio fue construir una biblioteca de presentación de fagos específica de Fab contra el WNV e identificar y seleccionar clones con actividades neutralizantes. El ARN total se extrajo de los linfocitos de sangre periférica (PBL) de dos individuos inmunizados y se utilizó RT-PCR para amplificar los fragmentos Fab que contenían las cadenas pesada (VH) y ligera (VL). Los genes amplificados se clonaron secuencialmente en el vector de expresión de anticuerpos recombinantes pComb3-H, y la biblioteca de presentación de fagos específicos de Fab se empaquetó con el fago auxiliar VCS-M13. Se llevaron a cabo cinco rondas de selección con el dominio III de la proteína E del VNO y luego se seleccionaron los anticuerpos de unión mediante ELISA.