Revista de leucemia
Acceso abierto
ISSN: 2329-6917
ISSN: 2329-6917
Ya Gao,Ying Xu, Jie Song, Jia-qiong Hong, Wei-bin Zhuo, Chun-yan Yang, Yu Zhang, Zhi-ping Fan, Yan-wu Guo, Chun-yan Yue, Hai-tao Sun y Bao -hong-ping
Objetivos: Las células madre mesenquimales de la médula ósea humana (hBMSC) se han utilizado para la prevención y tratamiento de la enfermedad aguda de injerto contra huésped (aGVHD) en pacientes post-trasplante de células madre hematopoyéticas. En este estudio, comparamos las características biológicas y la actividad inmunosupresora de las células madre mesenquimales amnióticas humanas (hAMSC) y hBMSC para proporcionar evidencia experimental del uso potencial de hAMSC para tratar aGVHD, resolviendo así el problema de fuentes insuficientes de hBMSC. Métodos: las HAMSC se aislaron mediante digestión enzimática. Las hBMSC se aislaron usando gradientes de densidad de Ficoll-Hypaque. Las características biológicas de ambos tipos de células madre se compararon mediante análisis morfológico, análisis de crecimiento celular, perfilado del ciclo celular, inmunofenotipado y ensayos de inmunofluorescencia. Se realizó un cocultivo in vitro de MSC y células mononucleares de sangre periférica (PBMC) y se midió la proliferación de linfocitos utilizando el ensayo Cell Counting Kit-8 (CCK-8). IFN-γ; la producción se determinó en el sobrenadante del cocultivo utilizando un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA). Resultados: tanto las hAMSC como las hBMSC tenían una morfología similar a la de los fibroblastos. Las hAMSC podrían mantenerse durante al menos 15 pases de cultivo, pero las hBMSC comenzaron a mostrar signos de envejecimiento y una proliferación notablemente reducida en 6-7 pases. No hubo diferencia significativa en la proporción de células en fase G2/M entre hAMSC y hBMSC (P > 0,05). La inmunofenotipificación reveló expresión positiva de CD105, CD90 y CD73 y expresión negativa de CD34, CD45, CD11b, CD19 y HLA-DR en la superficie de hAMSC y hBMSC. Las hAMSC fueron positivas para el 3/4 de octubre, pero las hBMSC no lo fueron. Tanto las hAMSC como las hBMSC expresaron vimentina. La proliferación de PBMC estimulada por PHA fue inhibida por hAMSC y hBMSC. Esta inhibición fue más fuerte a medida que aumentaba la proporción de MSC. No hubo diferencias significativas entre los efectos inhibidores de los dos tipos de MSC sobre la proliferación de PBMC (P > 0,05). Interferón-γ (IFN-γ) la producción fue menor cuando las PBMC se cultivaron conjuntamente con hAMSC o hBMSC que cuando se cultivaron solas (P<0,05). IFN-γ; la producción fue menor cuando se cocultivaron PBMC con hAMSC que cuando se cocultivaron con hBMSC (P > 0,05). Conclusión: Los resultados de este estudio demostraron que las hAMSC tienen una mayor actividad de proliferación y propiedades de células madre más claras que las hBMSC. Tanto las hAMSC como las hBMSC pudieron suprimir la proliferación de linfocitos de sangre periférica alogénicos y reducir el IFN-γ; secreción estimulada por PHA in vitro.