Biología celular y del desarrollo
Acceso abierto
ISSN: 2168-9296
ISSN: 2168-9296
Huma Alam, Chinnari Sumedha, Siddhartha Pati, Bisnu P Dash y Anil Chatterji
En los huevos en desarrollo del cangrejo herradura (Tachypleus gigas, Muller), el líquido perivitelino líquido (PVF) se produce en la etapa 21 de la embriogénesis. Además de mantener el equilibrio de la homeostasis dentro de los óvulos en desarrollo, también ayuda en la organogénesis. Teniendo en cuenta que PVF ayuda a la diferenciación y proliferación celular durante el desarrollo embrionario, intentamos examinar su actividad en la activación de células madre de médula ósea humana que se transforman en cardiomiocitos. Del perfil de PVF de diez picos obtenido del análisis de FPLC, solo la octava fracción (PVF-8) mostró la actividad más alta en la diferenciación de células madre de médula ósea humana en diferenciación de miocitos. Mediante análisis FACS, la dosis óptima de PVF-8 fue de 0,1 mg/ml, donde se observó la tasa máxima de diferenciación de células madre de médula ósea en miocitos. Dado que PVF-8 mostraba la mayor actividad de diferenciación de miocitos, se analizó más su pureza en SDSPAGE, donde se obtuvo una única banda de peso molecular de 29 kDa. La secuenciación de proteínas del PVF-8 mostró la presencia de 122 aminoácidos. Con el fin de identificar los miocitos presentes en las colonias formadas después del cultivo a largo plazo de células madre de médula ósea, las células que expresan miosina se identificaron mediante análisis inmunohistoquímico y FACS. En el análisis inmunohistoquímico, se encontró que PVF-8 induce una gran expresión de miosina en algunas células adherentes incubadas con él en comparación con las células de control cultivadas en presencia de VEGF o b-FGF. Además, en presencia de PVF-8, la actividad de la peroxidasa en las células expuestas superó a la del grupo de control. Estos resultados confirmaron que PVF-8 mejoró efectivamente la tasa de diferenciación de células madre de la médula ósea.