Revista de ciencia y terapia celular
Acceso abierto

abstracto

La proteína de choque térmico (HSP) 72 ingresa a los endosomas tempranos como preparación para la célula Liberación

Punit Kaur y Alexzander Asea

Propósito: establecer el mecanismo por el cual la hipertermia induce la liberación de Hsp72 en péptidos específicos de tumores para su suministro a las células presentadoras de antígenos (APC). Materiales y métodos: Se inyectaron células 4T1 scrb-shRNAGFP y Hsp72-shRNAGFP en la almohadilla mamaria de un ratón hembra BALB/c para determinar la cinética de la temperatura de los ratones expuestos a HT usando un baño de agua circulante e hipertermia mediada por nanoshell. La expresión de Hsp72 intracelular basal e inducida por calor se midió mediante inmunotransferencia con anti-Hsp72. Cuatro horas después del tratamiento con hipertermia (HT), se determinó la colocalización de Hsp72 utilizando inhibidores y se recuperaron los exosomas del sobrenadante y se midieron los niveles de Hsp72. El tamaño del tumor se midió después de la hipertermia. Resultados: En este estudio, mostramos que la Hsp72 liberada se encuentra en dos formas: 1) dentro de exosomas altamente inmunológicamente activos, conocidos por estar enriquecidos en complejos de clase I y II del complejo mayor de histocompatibilidad (MHC), moléculas coestimuladoras (CD40, CD80, CD86 ) y específicamente miembros de la familia HSP70 (incluidas Hsp72, Hsp73, Hsp75, Grp78) y la familia HSP90 (incluidas Hsp82, Hsp90, Grp96, Grp98) y, 2) como Hsp72-PC, en la que Hsp72 libre acompaña a péptidos específicos de tumores. Además, mostramos que la exposición de los tumores con 4T1 a la hipertermia (41 °C, 60 min) induce una regresión tumoral significativa (p<0,05) en comparación con los ratones con 4T1 mantenidos a temperatura ambiente (25 °C, 60 min). . Sin embargo, la inyección repetida de ratones portadores de tumores 4T1 con anticuerpo anti-Hsp72 anuló la regresión tumoral inducida por hipertermia. Las muestras de sangre tomadas en varios momentos confirmaron que el anticuerpo bloqueante redujo significativamente los niveles de Hsp72 en plasma. Conclusiones: Nuestros resultados sugirieron que la hipertermia estimuló la regresión tumoral, en parte, al estimular la liberación de Hsp72 de los tumores que es captada por APC como preparación para activar las respuestas citotóxicas de CTL CD8+ contra los tumores. Dado que las HSP se encuentran en todos los organismos celulares, es probable que se apliquen a la prevención/tratamiento de enfermedades de animales relevantes para la agricultura. Se espera que contribuya a una comprensión más amplia de las vías de tráfico intracelular como enfoque terapéutico.