Revista de Síndromes Genéticos y Terapia Génica
Acceso abierto

abstracto

Proteína líquida de enfermedad quística macroscópica-15 (GCDFP-15)/inducible por prolactina Proteína (PIP) como biomarcador salival funcional para primaria de Sjogren Síndrome

Gallo A, Martini D, Sernissi F, Giacomelli C, Pepe P, Rossi C, Riveros PP, Mosca M, Alevizos I y Baldini C

Antecedentes: La proteína del líquido de la enfermedad quística macroscópica-15 (GCDFP-15)/proteína inducible por prolactina (PIP) es una glicoproteína acinar secretora de 14 KDa que hemos descrito recientemente como significativamente menor en muestras salivales de pacientes con síndrome de Sjögren primario (SSp) en comparación con voluntarios sanos mediante análisis proteómico.

Objetivos del estudio: (1) validar nuestros datos anteriores sobre la disminución de la proteína GCDFP-15/PIP en un mayor número de sujetos con SSp (2) para integrar los resultados proteómicos con inmunoensayos complementarios para aclarar mejor la relevancia fisiopatológica de GCDFP-15/PIP en la exocrinopatía del SSp (3) para evaluar tanto la expresión glandular de GCDFP-15/PIP como los niveles de ARNm de GCDFP-15/PIP glandular en los pacientes’ biopsias de glándulas salivales menores (MSG) para verificar si la reducción observada de GCDFP-15/PIP en la saliva puede estar relacionada con una disminución en la producción de proteínas.

Pacientes y métodos: Un total de 123 muestras salivales de pacientes afectos de SSp, síndrome sicca no-SS y voluntarios sanos emparejados por sexo fueron analizadas mediante diferentes técnicas proteómicas (SELDI-TOF- MS, 2DE, MALDI-TOF-MS). A continuación, se validó la expresión de GCDFP-15/PIP mediante análisis de transferencia Western. A continuación, se realizaron PCR en tiempo real e inmunohistoquímica para GCDFP-15/PIP en las biopsias de glándulas salivales menores (MSG).

Resultados: Mediante el uso de análisis proteómicos complementarios, encontramos que un pico putativo de 16547 m/z estaba entre los mejores biomarcadores independientes para pSS capaz de discriminar entre pacientes y controles sanos con una sensibilidad del 96 % y una especificidad del 70%, con un error de validación cruzada global del 29%. Identificamos el pico como la proteína GCDFP-15/PIP y verificamos que la intensidad de GCDFP-15/PIP fue significativamente menor en pacientes con SSp en comparación con sujetos secos sin SS y controles sanos (p<0,0001). La expresión de GCDFP-15/PIP también se correlacionó con la tasa de flujo salival (r = 0,312, p = 0,023) y la puntuación de enfoque de las biopsias de MSG (r = -0,377, p = 0,04). Finalmente, la inmunohistoquímica confirmó que la tinción de GCDFP-15/PIP era débil en los acinos mucosos y la PCR en tiempo real mostró que el ARNm de GCDFP-15/PIP fue significativamente más bajo en pacientes con SSp en comparación con sujetos secos sin SS y controles sanos (p = 0,023). ) apoyando así la hipótesis de que la reducción observada de GCDFP-15/PIP en la saliva del SSp puede estar relacionada con una disminución en la producción de proteína.

Conclusión: En este estudio mediante diferentes técnicas ómicas complementarias, confirmamos el papel potencial de GCDFP-15/PIP como un nuevo biomarcador para pSS. Este hallazgo también podría ser importante desde el punto de vista funcional, ya que se ha demostrado previamente que GCDFP-15/PIP se une a la acuaporina 5 (AQP5), un canal de agua de las glándulas salivales, fundamental para la formación de saliva que se sabe que está regulado a la baja en el SSp. Es probable que explorar el eje GCDFP-15/PIP/AQP5 ayude a comprender mejor el mecanismo de la disfunción de las glándulas salivales en el SSp.