Revista de glucómica y lipidómica
Acceso abierto

abstracto

Análisis del perfil glucómico por MALDI TOF/MS en LCR humano

Xueli Li

La glicosilación de proteínas es importante para el desarrollo y la función del cerebro humano. La mayoría de los >100 subtipos conocidos se presentan con discapacidad intelectual. Para explorar posibles defectos en la glicosilación de proteínas en el cerebro, desarrollamos un análisis glucómico integral de N-glucoma, O-glucoma y glucoma libre mediante MALDI TOF/MS en líquido cefalorraquídeo (LCR). Se filtraron 0,4 ml de LCR para separar los oligosacáridos libres de la glicoproteína. Los N-glicanos se liberaron mediante digestión con PNGasa F y los O-glicanos se liberaron por separado mediante una reacción de eliminación beta reductora. Después de la purificación, los glucanos se permetilaron y analizaron mediante MALDI TOF/MS. Treinta y ocho especies diferentes de N-glicanos, 85 especies de oligosacáridos libres y 25 especies de O-glicanos se identificaron en 10 muestras de LCR de control. En comparación con los datos de la glucómica del plasma, el LCR tiene muchas más especies de O-glucanos, incluidos los O-glucanos manosilados y los O-glucanos polisialilados. Al comparar 166 muestras de LCR de pacientes con enfermedades neurológicas no diagnosticadas del Programa de enfermedades no diagnosticadas (UDP) de los NIH con 10 muestras de LCR de control, aproximadamente 20 pacientes con UDP tienen perfiles glucómicos del LCR significativamente desviados de los perfiles de las muestras de LCR de control. Cuatro de los pacientes con UDP tienen trastornos genéticos conocidos que alteran la glicosilación de proteínas en el cerebro humano, incluido un paciente con supuesta deficiencia de CAD, un defecto en la biosíntesis de uridina. Curiosamente, uno de los pacientes conocidos tiene un perfil de glucemia en plasma y un perfil de oligosacáridos en orina completamente normales, mientras que sus perfiles de N en LCR y O-glucómica son anormales. Nuestros resultados sugieren que el análisis de la glucómica del LCR podría ser una herramienta útil para descubrir nuevas enfermedades o mecanismos de enfermedad