Química orgánica: investigación actual
Acceso abierto

abstracto

Codificación genética de grupos funcionales bioortogonales para el marcaje de proteínas de sitio selectivo

Wei Wan, Yane-Shih Wang y Wenshe R. Liu

El marcaje de proteínas de sitio selectivo es un enfoque indispensable en el intenso campo de investigación de la biología química actual. Los estudios relacionados con el etiquetado selectivo de proteínas abarcan desde el análisis dinámico de proteínas in vitro hasta la investigación de la interacción proteína-proteína en células vivas. En la última década, se han introducido múltiples métodos para lograr el marcaje de proteínas selectivo de sitio. Estos incluyen la fusión genética de la proteína fluorescente verde y sus derivados, el marcado químico selectivo de proteínas con etiquetas de fusión y la modificación específica del sitio de aminoácidos no canónicos que están codificados genéticamente. Utilizando pares ortogonales evolucionados de aminoacil-tRNA sintetasa-supresor sin sentido de tRNA, se han incorporado genéticamente aminoácidos no canónicos con grupos funcionales bioortogonales como azida, alquino, tetrazina, alqueno, ceto, fenilhaluro, etc. en proteínas en E. coli, levadura y células mamíferas. La codificación genética de estos aminoácidos no canónicos permite múltiples formas para el etiquetado selectivo de proteínas tanto in vitro como in vivo, lo que permite diversas estrategias para interrogar las funciones de las proteínas. Esta revisión pretende brindar una breve introducción a la técnica de incorporación genética de aminoácidos no canónicos y los avances recientes en la aplicación de esta técnica para lograr el etiquetado selectivo de proteínas.