ISSN: 2165-8048
Xin Cheng, Bo Yang, Dong Liu, L Juan He, Gan Chen, Yong Chen, R Fa Huang y Y Sheng Jiang
El gen de urato oxidasa se clonó en Lactobacillus bulgaria para producir urato oxidasa para descomponer el ácido úrico y tratar la hiperuricemia. Usando las secuencias del gen de urato oxidasa de Candida utilis (uricasa, E12709) en GenBank, se insertaron fragmentos del gen de urato oxidasa amplificados por PCR en el plásmido pMG36e para construir el plásmido recombinante PMG36e-U, que luego se electrotransformó en Lactobacillus bulgaria. Usamos SDS-PAGE para identificar la urato oxidasa en los lisados celulares de las bacterias modificadas genéticamente y para medir la actividad de la urato oxidasa. El gen de la urato oxidasa se amplificó por PCR a partir del genoma de Candida utilis. El plásmido recombinante PMG36e-U que contiene el gen de la urato oxidasa se electrotransformó con éxito en Lactobacillus bulgaria. El peso molecular de la subunidad de urato oxidasa sintetizada por las bacterias modificadas genéticamente fue de aproximadamente 34 KD según SDS-PAGE, y la actividad enzimática in vitro de la preparación de bacterias fue de hasta 0,33 u/mL. Conclusión: el gen de la urato oxidasa se clonó en Lactobacillus bulgaria y descompuso con éxito el ácido úrico.