Revista de Antivirales y Antirretrovirales
Acceso abierto

abstracto

Terapia génica usando un fragmento variable de cadena única secretado dirigido a CCR5 para inhibir la infección por VIH

Alexander Falkenhagen, Masoud Ameli, Sabah Asad, Stanley E Read y Sadhna Joshi

La interacción de R5 HIV con CCR5 celular es obligatoria para la entrada en las células huésped. El anticuerpo monoclonal humanizado PRO 140 enmascara la superficie celular CCR5 y bloquea eficazmente la infección por VIH R5. Si bien se ha demostrado que las administraciones semanales de PRO 140 reducen drásticamente la carga viral en los pacientes, las inyecciones frecuentes de anticuerpos purificados no son prácticas ni rentables. La ingeniería de células o tejidos modificados genéticamente para secretar proteínas terapéuticas en sitios de replicación viral puede reemplazar ventajosamente la administración continua de fármacos. Hemos diseñado un gen que codifica un fragmento variable de cadena única secretado de PRO 140, sscFvPRO140, y hemos utilizado un vector lentiviral para su entrega y expresión. El sscFvPRO140 se secretó de forma eficaz a partir de células modificadas genéticamente, se mantuvo estable en el sobrenadante del cultivo a 37 °C y se unió específicamente a las células que expresan CCR5. Se realizaron ensayos de infección de ronda única para evaluar la inhibición de la infección por VIH. sscFvPRO140 redujo la entrada del VIH R5 en las células diana no modificadas, aunque con una potencia más baja en comparación con lo informado para el anticuerpo monoclonal original. La entrada de X4 HIV, que utiliza CXCR4 como co-receptor, permaneció inalterada. Además, la entrada viral se redujo sustancialmente cuando se infectaron células diana de VIH modificadas genéticamente que expresaban sscFvPRO140. La terapia génica que utiliza moléculas intracelularmente activas, como las ribozimas o las nucleasas con dedos de zinc, solo confiere protección a las células diana modificadas genéticamente. Por el contrario, la estrategia de terapia génica propuesta basada en proteínas anti-VIH secretadas tiene el potencial de proteger las poblaciones de células diana del VIH modificadas genéticamente y no modificadas.