Revista de cromatografía y técnicas de separación
Acceso abierto

abstracto

Técnica de cromatografía de filtración en gel como herramienta de estudio sencillo de proteínas de plasma seminal en animales domésticos

Vasconcelos Andre Belico de, Oliveira Jamil Silvano de y Lagares Monique de Albuquerque

El líquido seminal es el componente líquido del esperma, que proporciona un entorno seguro para los espermatozoides. El plasma seminal tiene la característica común a muchos otros fluidos corporales, caracterizada por un alto rango dinámico de proteínas, que visualiza los procesos fisiológicos y bioquímicos del semen. Como en otros fluidos corporales, es conveniente distinguir en el plasma seminal entre proteicos y no proteicos. La técnica cromatográfica de exclusión molecular presenta puntos importantes para la preservación de proteínas constitucionales, además del fenómeno convencional; Las interacciones hidrofóbicas de exclusión de brujas pueden proporcionar una resolución más alta en el cromatograma y no proporcionan interacciones no específicas entre estructuras de proteínas. El objetivo fue el perfil cromatográfico para el estudio simple de proteínas de plasma seminal de animales domésticos (Sementales, Caninos y Caprinos), mediante la técnica de cromatografía de filtración en gel. Las muestras (proteínas de plasma seminal) se cromatografiaron en un Superose 12 HR 10/30, equilibrado con 25 mMTris-HCl (Sigma) con NaCl 0,15 M (Sigma), pH 7,4 a temperatura ambiente en un cromatógrafo líquido de rápida resolución (sistema FPLC). ), utilizando un caudal de 0,5 mL.min-1. Hubo una separación molecular de pesos moleculares significativamente diferentes, lo que hace posible la relación logarítmica entre el peso molecular y el volumen de elución. La calibración de la columna de filtración en gel resultó en una ecuación y = ax + b, donde los valores de a y b fueron 5,43 y -2,175, respectivamente, y los errores correspondientes fueron 0,115 y 0,256, respectivamente. El error experimental fue inferior al 5% para la mayoría de las masas moleculares de proteínas. El trabajo mostró que la técnica de cromatografía de filtración en gel proporciona una excelente repetibilidad analítica y, por lo tanto, podría ser una herramienta valiosa para el estudio preliminar del plasma seminal.