Revista de cromatografía y técnicas de separación
Acceso abierto

abstracto

Validación completa de un método de bioanálisis ICP-MS de alta resolución para hierro en plasma humano con K2EDTA

Monica Whitmire, Anastasia Osredkar, Jennifer Ammerman, Jeff Biss, Chaoyang Huang, Tracy Marshall, Krista Ehringer y Patricia de Lisio

Propósito: validar un método bioanalítico de espectrometría de masas con plasma acoplado inductivamente (ICP-MS) para la cuantificación de hierro en plasma humano con K2EDTA (matriz). Este método fue validado utilizando parámetros típicos de validación bioanalítica. Materiales y métodos: Los estándares de referencia de hierro y el estándar interno de germanio (IS) fueron de Ultra Scientific. El agua reactiva tenía una resistividad sim 18 Mcm. El ácido nítrico y el ácido clorhídrico eran de grado ultra puro. La matriz en blanco se adquirió de BioReclamation. La linealidad se evaluó usando ocho estándares preparados en matriz proxy en un rango equivalente a 0.5-20 ?g de hierro/mL de matriz al principio y al final de cada corrida. Las muestras de control de calidad (QC) se prepararon fortaleciendo la matriz a 0,5, 1,5, 10, 15 y 100 µg/mL. En cada serie se incluyó un blanco que contenía IS y un blanco doble. La selectividad se evaluó usando seis lotes diferentes de matriz fortificada con IS y analito al nivel LLOQ. Se utilizó un ICP-MS de alta resolución Thermo-Finnigan ELEMENT2 para analizar las muestras preparadas. Resultados: La idoneidad, la selectividad, el arrastre y la robustez del sistema cumplieron con los criterios de aceptación. La linealidad se demostró consistentemente. Las recuperaciones para todos los estándares de calibración y QC estuvieron dentro de los criterios de aceptación. Se demostró la congelación/descongelación durante 4 ciclos. La reproducibilidad de banco fue exitosa después de 53 horas de almacenamiento a temperatura ambiente. La reproducibilidad de la reinyección fue satisfactoria después de 96 horas de almacenamiento a temperatura ambiente. La estabilidad del extracto fue satisfactoria después de 190 horas de almacenamiento a temperatura ambiente. La estabilidad de la solución IS fue satisfactoria después de 29 días de almacenamiento a temperatura ambiente. La estabilidad del estándar de calibración fue satisfactoria después de 8 días de almacenamiento a temperatura ambiente. La estabilidad de la solución madre del analito fue satisfactoria después de 29 días de almacenamiento a temperatura ambiente. La estabilidad de almacenamiento a largo plazo fue exitosa después de 31 días de 2 a 8 °C, 31 días de -15 a -25 °C y 30 días de almacenamiento de -70 a -90 °C. Conclusión: Este método bioanalítico ICP-MS fue validado con éxito para la cuantificación de hierro en plasma humano con K2EDTA.