ISSN: 2157-7013
Josef Skopalik, Michal Pasek, Milan Rychtarik, Zdenek Koristek, Evagabrielova, Peter Scheer, Peter Matejovic, Martinmodriansky y Martin Klabusay
Objetivos: El potencial regenerativo limitado de los cardiomiocitos (CM) provoca cambios irreversibles en el tejido cardíaco durante procesos patológicos. Sin embargo, las células mononucleares de la médula ósea (BM-MNC) pueden migrar a este tejido, incorporarse al área de miocitos muertos o faltantes y mejorar la función cardíaca global. El mecanismo de BMMSCs’ la incorporación e interacción con los CM no está clara. Nuestro objetivo era crear un modelo in vitro que permitiera estudiar la interacción de BM-MNC con CM y hacer una descripción microscópica de estas interacciones.
Métodos y resultados: Se aislaron CM de ratas adultas y recién nacidas. Las BM-MNC se aislaron de la médula ósea. Se agregaron BM-MNC al cultivo de miocitos. La adherencia de célula a célula y la expresión de Cx43 se evaluaron mediante microscopía de fluorescencia, los transitorios de Ca2+ se evaluaron en la comunicación de cardiomiocitos-BMC bajo estimulación eléctrica mediante medición de fluorescencia fluo-4. El análisis del transporte de calceína de las BM-MNC a las CM se realizó mediante microscopía de fluorescencia.
Conclusiones: La adherencia de las BM-MNC a las CM se produjo rápidamente y fue estable. Cx43 se detectó en zonas de contacto entre BM-MNC y CM; los pares que mostraron positividad para Cx43 representaron menos del 1 % de todos los pares de BM-MNC-cardiomiocitos en el cocultivo. Las estructuras conductoras entre CM y BM-MNC se formaron y verificaron mediante imágenes de transferencia de calceína y transitorios sincrónicos de Ca2+.