Revista de cromatografía y técnicas de separación
Acceso abierto

abstracto

Determinación fluorométrica de componentes vitamínicos en plasma humano mediante cromatografía líquida de ultra rendimiento

Edward C Bell, Mathew John, Rodney J Hughes y Thu Pham

Propósito: se ha desarrollado un método de cromatografía líquida de ultra rendimiento rápido, selectivo y sensible para la detección y cuantificación de varias vitaminas en plasma humano. Métodos: Se analizan alfa tocoferol, gamma tocoferol y retinol mediante detección de fluorescencia. Las longitudes de onda de excitación/emisión son 295 nm/330 nm y 325 nm/470 nm para el análisis de tocoferoles y retinol, respectivamente. Se emplea acetato de retinol como patrón interno. El método de fase inversa incorpora elución en gradiente con una fase móvil que consiste en metanol y acetonitrilo. La separación de los compuestos vitamínicos se logra utilizando una columna C18 híbrida de etilo con puente. Resultados: Los tiempos de retención para retinol, acetato de retinol, gamma tocoferol y alfa tocoferol son de 1,6 minutos, 1,8 minutos, 3,9 minutos y 4,3 minutos, respectivamente. Los límites de cuantificación para retinol, gamma tocoferol y alfa tocoferol fueron 0,02 µg/ml, 0,02 µg/ml y 0,1 µg/ml, respectivamente. Conclusión: El método de ensayo es adecuado para el análisis de estas vitaminas en plasma humano tras la ingestión de alimentos enriquecidos con estas vitaminas liposolubles.