Medicina Traslacional
Acceso abierto

abstracto

Determinación fluorescente de la actividad de unión de la albúmina sérica humana mediada por fosfolipasa A₂ secretora (sPLA₂) con fosfolípidos de membrana y ácidos grasos

 Tsao FHC, Xiang Z y Meyer KC

Albúmina sérica humana (HSA) es una proteína compleja con múltiples funciones y juega un papel clave en la homeostasis del sistema de órganos. Los cambios en los niveles de albúmina se asocian con peores resultados en enfermedades críticas. Sin embargo, las actividades funcionales de la albúmina sérica no se pueden determinar fácilmente para evaluar sus capacidades en la enfermedad. Se desarrollaron dos ensayos de liposomas fluorescentes sensibles y en tiempo real para determinar la actividad de unión de HSA, uno para medir la actividad de interacción entre la albúmina y los fosfolípidos de membrana (PL) y otro para medir la unión de la albúmina a los ácidos grasos (FA). Se usó fosfolipasa A2 secretora como mediador en el ensayo. Los ensayos de fluorescencia, sensibles pero sencillos, fueron específicos para medir las actividades de unión de la albúmina sérica con PL y FA. Entre las formas heterogéneas de albúmina, una pequeña fracción específica de albúmina (SFA) fue la única porción que interactuó con la membrana PL mientras que todas las fracciones fueron capaces de unirse a FA. La oxidación de albúmina o la unión previa de albúmina con FA y lisoPL (LPL) generados por sPLA2 a partir de liposomas PL redujeron las capacidades de unión de albúmina y SFA. En el suero de pacientes con neumonía y sepsis, la actividad de SFA estuvo ausente y la actividad de unión de albúmina-FA fue un 50 % menor que la de sujetos sanos, incluso después de ajustar el contenido de albúmina sérica. Este estudio muestra que los ensayos de unión de SFA-PL y albúmina-FA determinan específicamente las actividades de unión de la albúmina. Estos ensayos pueden ser útiles para controlar las capacidades de unión de la albúmina sérica en condiciones patológicas en pacientes en estado crítico.