Técnicas Avanzadas en Biología y Medicina
Acceso abierto

abstracto

Evaluación de la respuesta de anticuerpos IgA, IgG e IgM específicos del virus de la peste porcina clásica (CSFV) en cerdos vacunados con antígenos expresados en partículas de replicón de Alphavirus

Mohammad M Hossain* y Raymond RR Rowland

La glicoproteína E2 del virus de la peste porcina clásica (CSFV) se expresó en un sistema de expresión de partículas de replicón (RP). Se ha desarrollado un inmunoensayo de microesferas fluorescentes (FMIA) para la detección de anticuerpos específicos contra el virus de la peste porcina clásica E2 en cerdos vacunados con alfavirus RP. El E2 completo de CSFV (aa 1-376) se fragmentó en varias piezas y las proteínas recombinantes se expresaron en Escherichia coli. Las proteínas purificadas se conjugaron con perlas de microesferas, los antígenos diana se ensamblaron en un multiplex único y se probaron frente a sueros vacunados con antígenos expresados por alfavirus. Los resultados informados como intensidad de fluorescencia media (MFI) obtenida a partir del valor mediano para al menos 100 microesferas y los valores de MFI convertidos en relación positiva por muestra (S/P). De las ocho proteínas E2 recombinantes evaluadas en este estudio, los valores de MFI más altos se obtuvieron para E2 (aa 1-181). La glicoproteína E2 de CSFV se expresó en un sistema de expresión de replicón basado en alfavirus. Los resultados muestran que los animales vacunados tenían IgA, IgG e IgM específicas para el virus de la peste porcina clásica en suero y fluidos orales. Los valores de MFI para la muestra de suero negativa mostraron una reducción de 20 a 70 veces en comparación con la muestra de suero positiva. La respuesta de anticuerpos a los antígenos de CSFV fue IgG>IgM>IgA. Los resultados demostraron que la detección simultánea de anticuerpos IgG, IgM e IgA podría proporcionar una herramienta de diagnóstico mejorada.