Revista de Toxicología Clínica
Acceso abierto

abstracto

Evaluación por ELISA de la concentración de ricina en fluidos y tejidos después de la exposición a ricina en aerosol y evaluación de una Prueba inmunocromatográfica para el diagnóstico de campo

Gareth D Griffiths, Simon J Knight, Jane L Holley y Philippe Thullier

Introducción: Anteriormente, desarrollamos una prueba inmunocromatográfica (ICT) para el diagnóstico de la intoxicación pulmonar por ricina, que estaba destinada a utilizarse después de un frotis nasal. El límite de sensibilidad solicitado para tal diagnóstico se calculó pero no se probó experimentalmente, y no se consideró ninguna otra fuente de muestra. Aquí, este enfoque se evaluó en varias muestras tomadas de ratones intoxicados por una dosis baja de ricina en aerosol, para llevar el sistema al límite. Se evaluó la mejor fuente de muestreo para el diagnóstico de intoxicación por ricino, así como la validez del ICT.

Métodos: Se intoxicaron ratones con 3LCt50 de ricina en aerosol y se tomaron muestras de fluidos corporales (lavados nasales y pulmonares, sangre y orina) hasta 24 horas después de la intoxicación para evaluar su contenido de ricina mediante un ELISA sensible. Las concentraciones de ricina en tejidos sólidos (pulmones, hígado, corazón y riñones) también se evaluaron en ELISA en una etapa tardía, a fin de proporcionar una fuente de muestras para el diagnóstico forense si fuera necesario. Además, usando una solución estándar de ricino, las señales de ICT se compararon con ELISA. Cuando la concentración de ricina en los fluidos corporales estaba por encima del límite de sensibilidad de ICT, se utilizó la prueba rápida para evaluar la mejor fuente de muestreo y evaluar la validez de este enfoque.

Resultados: El límite de sensibilidad de ELISA fue de 150 ng/L y el ICT proporcionó una señal semicuantitativa cuando se utilizó sobre ricina diluida en solución salina tamponada con fosfato (PBS), con un límite de sensibilidad cercano a 1 µg/L. En el modelo animal, se observó que la concentración de ricina en el fluido nasal disminuyó después de la intoxicación, siendo inferior al límite de sensibilidad de las TIC 4 horas después de la exposición. Por el contrario, la concentración de ricina en el lavado pulmonar aumentó rápidamente hasta las 4 horas y luego se mantuvo estable hasta la hora 16, por lo que el lavado pulmonar fue la mejor fuente de muestra durante ese período de tiempo. El hígado fue la mejor fuente de tejido sólido para tomar muestras para el diagnóstico a las 24 horas. También hubo evidencia que sugería que la orina podría utilizarse con fines de diagnóstico, pero el ICT no pudo informar sobre este tipo de muestra.

Conclusión: después de la inhalación de ricina, el lavado nasal fue una buena fuente de muestra según lo calculado anteriormente, pero durante un período de tiempo limitado; aquí, la ricina probablemente se eliminó rápidamente por mecanismos fisiológicos. El lavado pulmonar se puede utilizar como una fuente alternativa de muestras de fluidos corporales que ICT puede probar con éxito. El hígado es la mejor fuente de muestra de tejido sólido en las etapas posteriores del envenenamiento, para el diagnóstico forense. De manera más general, cuando se sospecha la vía pulmonar de la intoxicación, se debe considerar el análisis de lavado pulmonar, incluso si el fluido nasal resulta negativo. El lavado pulmonar debe estar disponible en los hospitales de campaña para proporcionar el disparador para tratar la intoxicación pulmonar por ricina, y quizás también otras armas biológicas o contaminantes por esta vía.