Ingeniería enzimática
Acceso abierto

abstracto

Evaluación y caracterización de la producción de proteasa por Bacillus sp. inducida por mutagénesis UV

Neha Karn y Santosh Kumar Karn

 Mutantes fenotípicos de Bacillus sp. fueron desarrollados por irradiación UV para probar su capacidad para mejorar la actividad de la proteasa. Entre los cinco mutantes, se encontró que RS1 era más eficiente en comparación con otros mutantes y la cepa de tipo salvaje. El máximo de proteasa se obtuvo del extracto celular de Bacillus sp. Cepa RS1, que se utilizó para la purificación y caracterización. El filtrado del cultivo de Bacillus sp. RS1 se purificó con precipitación con sulfato de amonio; el sobrenadante filtrado del cultivo había mostrado la actividad de proteasa específica más alta y contenía el 86% del porcentaje total de proteasa del cultivo. Se usó una precipitación con sulfato de amonio entre 40-70% para purificar la proteasa y dio como resultado un aumento de 20 veces en la actividad específica en comparación con el sobrenadante no concentrado. La purificación en columna dio como resultado un aumento de 44 veces en la actividad específica en comparación con el sobrenadante no concentrado de Bacillus sp. RS1. Sobre la base de los resultados obtenidos, se encontró que la cepa mutante RS1 era la más adecuada para la purificación de la enzima proteasa. La enzima proteasa purificada tuvo una actividad máxima a pH 7,0 con tampón de fosfato y el tiempo de incubación óptimo fue de 24 horas. La proteasa aislada de RS1 es estable a un pH de 8,5 y a una temperatura de 60 °C; además, esta enzima puede explotarse comercialmente.