Revista de Inmunología Clínica y Celular
Acceso abierto

abstracto

Mycobacterium tuberculosis induce la expansión de linfocitos T CD4 positivos para Foxp3 con un perfil regulador en sujetos sanos no sensibilizados a la tuberculina: implicaciones para una inmunización eficaz contra la TB

Christina S. Hirsch, Roxana Rojas, Mianda Wu y Zahra Toossi

Objetivo: La infección por MTB o la exposición a componentes de MTB se asocia con una intensa estimulación microbiana del sistema inmunitario, a través de componentes antigénicos y TLR, y la inducción de un medio rico en citoquinas proinflamatorias/antiinflamatorias. Aquí, abordamos la base de la expansión de células T reguladoras inducidas (iT-reg) en respuesta a la estimulación de MTB, en ausencia de respuesta previa al antígeno de células T.
Métodos: Se estimularon PBMC de controles TST negativos y TST positivos no infectados con VIH-1 mediante lisado virulento de MTB H37Rv (L), una preparación de prensa francesa de MTB que incluye todos los componentes bacterianos. El fenotipo de iT-reg inducido por MTB H37RvL se evaluó mediante inmunotinción y citometría de flujo. La capacidad funcional de iT-reg se evaluó mediante la incorporación de ³H-timidina e IFNγ; producción de células T no adherentes (NAC) en presencia o ausencia de iT-reg en sobrenadantes de cultivo correspondientes en respuesta a la estimulación con TCR. Se utilizó PCR en tiempo real para evaluar la expresión de ARNm de IDO y FoxP3.
Resultados: La capacidad de MTB H37RvL para inducir células T CD4⁺CD25^hi+ Foxp3⁺ en PBMC de TST sujetos negativos fue robusto (p < 0,001) y, de hecho, comparable a la inducción de iT-reg en PBMC de sujetos positivos para TST. MTB inducida por CD4⁺CD25^hi+ T-reg eran TGFβ positivo (p<0,05). Además, MTB H37RvL indujo CD4⁺CD25^hi+ Foxp3⁺ iT-reg suprimió la incorporación de ³H-timidina e IFN&gamma ; producción de células T no adherentes (NAC) en respuesta a la estimulación con TCR. La inducción de MTB H37RvL de iT-reg fue significativamente más fuerte (p < 0,01) que la de los ligandos TLR-2, TLR-4, TLR-9 o la combinación de todos los ligandos TLR. MTB H37RvL indujo la expresión de ARNm de indoleamina 2,3-didesoxigenasa (IDO) en monocitos (p<0,001), y el cocultivo con el inhibidor de IDO, D-1MT, disminuyó las frecuencias de T-reg (p<0,05). Inhibición de TGFβ; por siRNA redujo la expresión de mRNA de Foxp3 en células T CD4 (p<0.05).
Conclusión: Por lo tanto, MTB y sus componentes expanden el iT-reg funcional en células mononucleares humanas de sujetos no sensibilizados con MTB. Además, la expansión de iT-reg inducida por MTB depende de la expresión de fagocitos mononucleares tanto de TGFβ; e IDO.