ISSN: 2329-9029
Buttibwa M Kawuki RS, Oshaba B, Eyokia M, Hershey C, Perera PIP, Heberle-Bors E, Baguma Y, Tugume AK
La embriogénesis de microsporas es la plasticidad del desarrollo de los gametofitos masculinos juveniles para cambiar desde el polen hasta el desarrollo del embrión tras la exposición al estrés in vitro. Es un método común para obtener plantas haploides y haploides dobles en programas de mejoramiento para el desarrollo de variedades superiores a través de diploidización haploide que permite un desarrollo rápido de líneas homocigotas a partir de padres heterocigotas. En la yuca, la obtención de haploidización a través de métodos tradicionales de autofecundación sucesiva es difícil debido al largo ciclo reproductivo de la yuca, la alta heterocigosidad y la depresión endogámica. Como primer paso hacia la embriogénesis de microsporas, no se ha investigado en la yuca la inducción de callos después del tratamiento térmico. Utilizamos dos variedades élites de yuca de Uganda, en lo sucesivo denominadas "genotipos", NASE3 y NASE14, para el estudio de la inducción de callos. Se utilizó estrés térmico de 40 °C durante 0, 6, 12, 18 y 24 h y medio Murashige y Skoog suplementado con sacarosa al 2-9 % y ácido 2,4-diclorofenoxiacético. El calentamiento de las anteras de NASE3 a 40 °C durante 6 horas dio como resultado un porcentaje significativamente mayor de inducción de callos en medio MS suplementado con sacarosa al 2 %. Los callos emergieron del interior de las anteras con una producción influenciada por el genotipo, la concentración de sacarosa, la densidad de las anteras y la duración en cultivo (P≤0.001). Se observó una diferenciación limitada de callos in vitro en medios suplementados con auxina y citoquinina. En ambos genotipos se obtuvo callo embriogénico en medio líquido, mientras que en medio sólido se logró callo verde. Este es un paso importante aguas arriba de la ruta de producción de plantas dobles haploides en la yuca: se necesita una optimización rigurosa de los protocolos aguas abajo de la inducción de callos para la regeneración de embriones derivados de microsporas y plantas haploides.