Biología celular y del desarrollo
Acceso abierto

abstracto

In Vitro Condiciones de cultivo para tejidos endocrinos reproductivos de Pimephales promelas

Johnston T, Morgan RE, Perkins E, Ferguson DC y Cropek DM

Los estudios examinaron los efectos de diferentes condiciones de cultivo para el cerebro, las gónadas (testículos y ovario) y el hígado de Piscardo de cabeza gorda (Pimephales promelas) (FHM) macho y hembra adultos durante una evaluación de viabilidad y funcionalidad de 28 días. Se probaron cinco parámetros, incluidos el pH del medio, la temperatura de incubación, la composición del medio, la tasa de intercambio del medio y el sustrato. Dentro de los rangos probados, la temperatura de incubación fue la que más influyó en la viabilidad del tejido con mejoras dramáticas usando temperaturas de incubación más frías (<18 °C) durante todo el período de prueba de 28 días. Los tejidos permanecieron igualmente viables en cinco medios de cultivo comunes diferentes, aunque se observó la mayor viabilidad con cada medio con un cambio de medio semanal sobre intercambios más frecuentes, alginato sobre poliestireno y un pH de medio cercano a los valores fisiológicos. El uso de estas condiciones combinadas dio como resultado una función continua del tejido testicular y ovárico durante los 28 días completos, como lo indica la producción continua de 11-cetotestosterona (11-KT) por los testículos y estradiol (E2) por los ovarios. La función hepática se mantuvo durante siete días, aunque la producción de vitelogenina en respuesta a la adición de E2 finalmente disminuyó con el tiempo. La viabilidad tisular constante durante los períodos de tiempo comúnmente utilizados para los estudios in vivo mejorará el vínculo de los estudios de toxicología tisular in vitro con los impactos a nivel de población y de peces completos.