Revista de bioquímica y fisiología vegetal
Acceso abierto

abstracto

Regeneración in vitro eficiente, análisis de fidelidad molecular y Agrobacterium tumifaciens: transformación genética mediada de Grewia asiatica L.

Wani TA, Satiander Rana, Bhat WW, Pandith SA, Niha Dhar, Sumeer Razdan, Suresh Chandra, Namrata Sharma y Surrinder K Lattoo

Grewia asiatica es un arbusto frutal de importancia dietoterapéutica, autóctono de la India. Es un rico recurso de triterpinoides y flavonoides y posee muchos supuestos beneficios para la salud. Dos de los inconvenientes que incluyen la vida útil corta de sus frutos y el mayor volumen de semillas impiden su plena explotación. El aborto de semillas para desarrollar cultivares sin semillas a través de intervenciones biotecnológicas es una opción viable. Uno de los requisitos previos para dicha estrategia es desarrollar protocolos eficientes de regeneración y transformación de plantas en G. asiatica. En este contexto, se logró la inducción de brotes múltiples a partir de explantes nodales con yemas axilares, en cultivo en medio Woody Plant (WM) enriquecido con sacarosa al 3% (p/v), 2 veces; Kinetina 10-5M (Kn) y 1 × Ácido indol-3-butírico (IBA) 10-5M dando lugar a un promedio de 4,25 ± 0,71 microbrotes por explante. Más del 90% de los explantes formaron microbrotes con una longitud media de brotes de 10,5 ± 1,96 cm que conduce a la regeneración de toda la planta. Los brotes sanos regenerados mostraron un enraizamiento prolífico de más del 95 % en WM suplementado con 4,8 × Ácido indol-3-butírico 10-6M (IBA). Siguiendo procedimientos simples de endurecimiento, las plántulas enraizadas se transfirieron a suelo-arena (1:1; v/v) con un éxito de alrededor del 92%. La fidelidad genética se evaluó utilizando ADN polimórfico amplificado al azar (RAPD). Además, se desarrolló un protocolo de transformación genética mediada por Agrobacterium utilizando la cepa GV2260 de A. tumefaciens que alberga el vector binario p35SGUSINT que contiene el gen de higromicina fosfotransferasa (hpt). La transformación se verificó mediante el ensayo GUS y la detección de la higromicina fosfotransferasa (hpt) mediante la reacción en cadena de la polimerasa. La regeneración in vitro y la fidelidad molecular subsiguiente de las plantas regeneradas y los estudios de transformación no se han informado hasta ahora para G. asiatica.