ISSN: 2155-9600
Zeynab Alborzi, Arash Zibaee, Samar Ramzi y Jalal Jalali Sendi
Dos lectinas específicas de galactosa, RSAI y RSAII, se purificaron a partir de esclerocios de Rhizoctonia solani Kühn y se evaluaron sus efectos inhibitorios sobre la α-amilasa digestiva de Pieris brassicae Linnaeus. Los resultados revelaron un peso molecular de 16 y 15,7 kDa y una concentración inhibitoria IC50 de 0,87 y 1,68 mg/ml para RSAI y RSAII, respectivamente. En el experimento de PAGE nativo, ambos RSA provocaron la desaparición de la banda A2 de la enzima y una disminución de la nitidez de la banda A1. La determinación de los parámetros cinéticos de la α-amilasa utilizando el análisis de Lineweaver-Burk reveló que, en comparación con el control, ambas lectinas redujeron la Vmax mientras que la Km aumentó solo en presencia de RSAII. Por lo tanto, los parámetros cinéticos indicaron inhibiciones mixtas y no competitivas para RSAI y RSAII, respectivamente. Además, RSAI y RSAII mostraron la mayor inhibición dentro del rango de pH y temperatura óptimo para la actividad enzimática en el grupo de control, es decir, a valores de pH de 9 (RSAI) y 11 (RSAII) y temperatura de 30°. C. La incubación de RSA a 50, 60 y 70 °C mostró una alta estabilidad de RSAII, mientras que RSAI perdió potencial inhibidor a 70 °C. Los resultados del presente estudio indican claramente los efectos negativos in vitro de los RSA sobre la α-amilasa digestiva de P. brassicae.