Revista de Oftalmología Clínica y Experimental
Acceso abierto

abstracto

Diferenciación de células madre derivadas de tejido adiposo humano a lo largo del linaje de queratocitos In vitro

Shijia Zhang, Ladan Espandar, Kathleen M.P. Imhof y Bruce A. Bunnell

Propósito: Evaluar la diferenciación de células madre derivadas de tejido adiposo humano (hASC) para el linaje de queratocitos por cocultivo con queratocitos primarios in vitro.
Materiales y métodos: Un sistema de cocultivo que usa insertos transwell para cultivar hASC en el fondo y queratocitos en la parte superior en medio de diferenciación de queratocitos (KDM). Las hASC que se cultivaron en medio de cultivo completo (CCM) y KDM se usaron como control. Después de 16 días, se examinaron las hASC en cuanto a cambios morfológicos y proliferación mediante recuento celular. Se utilizaron qRT-PCR y citometría de flujo para detectar la expresión de la familia de aldehído deshidrogenasa 3, miembro A1 (ALDH3A1) y queratocan.
Resultados: las hASC se volvieron más dendríticas y alargadas en el sistema de cocultivo en relación con CCM y KDM. El tiempo de duplicación de las células fue mayor a medida que avanzaba la diferenciación. qRT-PCR mostró una tendencia definida hacia una mayor expresión de ALDH3A1 y queratocano en el sistema de cocultivo a pesar de los valores de p estadísticamente no significativos. La citometría de flujo mostró niveles de proteína significativamente mayores de ALDH3A1 y queratocano en el sistema de cocultivo en relación con el grupo CCM (p<0,001) e incluso en relación con el grupo KDM (p<0,001 para ALDH3A1 y p<0,01 para queratocano).
< strong>Conclusión: El método de cocultivo es un enfoque prometedor para inducir la diferenciación de las poblaciones de células madre antes de las aplicaciones in vivo. Este estudio revela un importante potencial para la bioingeniería del tejido corneal utilizando células madre multipotenciales autólogas.