Pediatría y Terapéutica
Acceso abierto

abstracto

Desarrollo de dos ensayos de PCR multiplex en tiempo real para la detección rápida de virus de ARN y ADN asociados con gastroenteritis en pacientes pediátricos

Dongmei Chen, Yu Sun, Linqing Zhao*, Yuan Qian, Runan Zhu, Liying Liu, Liping Jia, Huijin Dong, Jie Deng, Li Deng

Antecedentes: la gastroenteritis viral es una de las causas más comunes de morbilidad y mortalidad en bebés y niños pequeños en China. Objetivos: Desarrollar un método de PCR en tiempo real rápido y sensible capaz de detectar simultáneamente varios virus asociados con gastroenteritis en pacientes pediátricos. Métodos: Se diseñaron y evaluaron dos ensayos de PCR multiplex en tiempo real, el primero dirigido a los virus de ARN: rotavirus, norovirus y parachovirus y el segundo a los virus de ADN: adenovirus humano y bocavirus humano 2, para determinar su especificidad y sensibilidad. Los ensayos multiplex se evaluaron utilizando muestras clínicas y se compararon con RT-PCR/PCR convencional. Resultados Los ensayos multiplex desarrollados en el estudio tuvieron éxito en la detección de los cinco virus objetivo. No se presentaron reacciones cruzadas con un panel de otros virus humanos. Los ensayos fueron lo suficientemente sensibles como para detectar tan solo una copia de ARN diana o ADN plasmídico transcrito in vitro en una sola reacción. En comparación con la RT-PCR o la PCR convencionales, los ensayos multiplex mostraron una sensibilidad aceptable del 86,2 % al 95,7 % junto con una alta especificidad (97,2 % al 99,5 %) en la detección de rotavirus, norovirus y adenovirus.   Conclusión: el desarrollo de estos dos ensayos multiplex debería resultar en una mejora significativa en la detección de patógenos virales asociados con la gastroenteritis pediátrica en China.