Revista de cromatografía y técnicas de separación
Acceso abierto

abstracto

Determinación de alopurinol y oxipurinol en plasma canino mediante cromatografía líquida de alta resolución con detector ultravioleta: aplicación para estudios farmacocinéticos

Godoy ALPC, De Jesus C, De Oliveira ML, Rocha A, Pereira MPM, Larangeira DF, Lanchote VL, Barrouin-Melo SM

Se desarrolló y validó la cromatografía líquida de alta resolución con detección ultravioleta (HPLC-UV) para la cuantificación de alopurinol y su metabolito activo oxipurinol; en plasma canino con leishmaniasis visceral zoonótica adquirida naturalmente. El alopurinol es un potente inhibidor de la enzima xantina oxidasa; una enzima que cataliza la conversión de hipoxantina a xantina y de xantina a ácido úrico. En medicina veterinaria el alopurinol está indicado en el tratamiento de la leishmaniasis visceral canina. El alopurinol se utiliza para inhibir la síntesis de ARN de Leishmania. Las condiciones definidas para el desarrollo del análisis cromatográfico de muestras de plasma canino utilizando la fase móvil del HPLC-UV consisten en una mezcla de 0,1% de agua, 88% de ácido fórmico y 0,25% de acetonitrilo. El alopurinol y el oxipurinol se separaron en una columna LiChroCART^® 125-4 LiChrospher^® 100 RP-8 (5 µm) utilizando una velocidad de flujo de 0,7 mL min< sup>-1 y el funcionamiento del detector fue a una longitud de onda de 254 nm. Se utilizó aciclovir como patrón interno. La validación del método HPLC-UV estuvo determinada por los límites de detección y cuantificación, linealidad, reproducibilidad y repetibilidad. El método tenía un límite inferior de cuantificación de 0,1 µg.mL^-1 tanto para alopurinol como para oxipurinol. El análisis fue lineal a concentraciones de 0,1-20,0 µg.mL^-1 tanto para alopurinol como para su oxipurinol. El valor de precisión intracorriente e intercorriente para todas las concentraciones presentadas tuvo un coeficiente de variación inferior al 15%. Los límites de confianza de HPLC-UV para el análisis de alopurinol y oxipurinol en plasma canino indican que el método es aplicable al estudio farmacocinético de dosis múltiples de alopurinol en perros. Es eficiente, preciso y sensible. Este estudio de investigación farmacocinética de alopurinol y oxipurinol en perros con leishmaniasis visceral en estadio I y II arrojó resultados de investigación similares que se correlacionaron con la investigación de perros sanos.