HIRA kumari Shah
Se estudió el efecto citotóxico del eugenol sobre la expresión de marcadores moleculares relacionados con la diferenciación osteogénica de las células de la pulpa dental humana, como la síntesis de colágeno y la expresión de dos genes relacionados con la osteogénesis, la fosfatasa alcalina (ALP) y la sialoproteína ósea (BSP). estudiado utilizando células de pulpa dental humana (células D824). El crecimiento celular y la supervivencia disminuyeron por el tratamiento de las células con eugenol de una manera dependiente de la concentración. La tasa de incorporación de [3H] prolina en la fracción insoluble en ácido y la síntesis de colágenos tipo I-V también se redujeron mediante el tratamiento de las células con eugenol de forma dependiente de la concentración. La expresión de ARNm de ALP apenas se vio afectada encélulas expuestas a eugenol, mientras que la expresión de mRNA y proteína de BSP se reguló a la baja dependiendo de las concentraciones de eugenol. Los resultados sugieren que debido a que la síntesis de colágeno y la expresión de BSP juegan un papel fundamental en la formación de tejido duro, el eugenol utilizado para el tratamiento de endodoncia puede dar lugar a efectos citotóxicos para el funcionamiento normal de las células madre .se ha informado que existe en el tejido de la pulpa dental humana y en el ligamento periodontal. El eugenol (4-alil-2-metoxifenol) es el principal componente del aceite de clavo (Eugenia cariofilato). Se utiliza como agente de fragancia y sabor, atrayente de insectos y como analgésico tópico antiséptico y antiinflamatorio en odontología. Mezclado con óxido de zinc en una pasta espesa, el eugenol también se usa en odontología como componente de apósitos periodontales, materiales de impresión y medicamentos endodónticos. Algunos de los medicamentos endodónticos administrados a los dientes pueden alcanzar el tejido pulpar o el periodonto después de penetrar el esmalte y la dentina o atravesar los agujeros apicales, respectivamente [1]. Si los medicamentos endodónticos fueran citotóxicos, podrían alterar la función normal de las células madrese informó que existe en el tejido de la pulpa dental humana [2] y el ligamento periodontal [3]. Por lo tanto, es importante estudiar la citotoxicidad de los agentes químicos utilizados para el tratamiento de endodoncia. A pesar del amplio uso clínico en odontología, el eugenol es citotóxico para varios tipos de células humanas, incluidas las células de la pulpa dental [4], los fibroblastos gingivales [5] y los fibroblastos del ligamento periodontal [6]. La citotoxicidad del eugenol mostrada en casi todos los estudios estuvo determinada por el crecimiento o viabilidad de las célulastratados con eugenol. Se han realizado pocos estudios para determinar el efecto citotóxico del eugenol en los fenotipos relacionados con la diferenciación en las células de la pulpa dental humana. En el presente estudio, investigamos el efecto citotóxico del eugenol en la expresión de marcadores moleculares relacionados con la diferenciación osteogénica de las células de la pulpa dental humana , como el colágeno Efecto citotóxico del eugenol en la expresión de la diferenciación molecular y osteogénica de las células de la pulpa dental humanaHIRA kumari Shah Bharatpur Central Hospital, Nepal Síntesis y expresión de dos genes relacionados con la osteogénesis, la fosfatasa alcalina (ALP) y la sialoproteína ósea (BSP), en células de pulpa dental humana. Goldberg et al. [7] han demostrado que las proteínas relacionadas con la osteogénesis, como el colágeno, la ALP y la BSP, se sintetizan durante la dentinogénesis fisiológica y reparadora. El colágeno, particularmente el tipo I, compone el 90% de la matriz de dentina. La matriz de colágeno proporciona no solo el andamiaje para promover y desarrollar un tejido mineralizado, sino también un excelente soporte natural para proteínas no colágenas como BSP y sialoproteína de dentina [7]. La ALP es un factor esencial en la mineralización de la dentina y en la formación de cemento acelular [8]. BSP es una de las proteínas no colagenosas que se encuentran en los huesos, la dentina y las pulpas dentales [9],osteoblastos [10] y células similares a odontoblastos [11]. Se une a los residuos específicos del colágeno tipo I [12] y actúa como un potente nucleador de la formación de hidroxiapatita en las fibrillas de colágeno [11]. Células de pulpa dental humana (células D824) derivadas del tejido de pulpa dental obtenido de un tercer molar inferior extraído de una mujer (22 años) se cultivaron como se describió anteriormente [13]. Las células D824 tienen la capacidad de formar nódulos mineralizados in vitro y reclutar células similares a odontoblastos y tejido similar a dentina en ratones inmunocomprometidos [13]. Todos los experimentos se llevaron a cabo utilizando células D824.en 10–15 pasajes. Eugenol (>95 % puro) se adquirió de Tokyo Kasei Kogyo (Tokio, Japón) y se disolvió a 200 mM en dimetilsulfóxido (DMSO) (Sigma-Aldrich, Tokio, Japón). La solución se diluyó con medio de cultivo a las concentraciones deseadas y se aplicó a las células D824. La supervivencia celular se determinó por la eficiencia de formación de colonias de las células tratadas con eugenol. Las células (500) se sembraron por triplicado en placas de 60 mm y se incubaron durante la noche. Las células se trataron con eugenol en concentraciones variables durante 24 h. Los cultivos de control se incubaron con medio DMSO. Después de dos lavados con 2 ml de medio fresco, las células se incubaron durante 13 días para la formación de colonias. Célulasse fijaron con metanol absoluto y se tiñeron con una solución de Giem sa al 10%. Thompson et al. [19]. han demostrado que el eugenol se metaboliza al intermedio reactivo, posiblemente una metida de quinona, en hepatocitos de rata aislados y que los efectos citotóxicos del eugenol en los hepatocitos dependen del metabolismo. Eu genol provoca la síntesis de ADN no programada en células de embrión de hámster sirio (SHE) en presencia de una mezcla de sobrenadante post-mitocondrial (PMS) de hígado de rata [20]. También induce aberraciones cromosómicas en las células SHE, y las frecuencias de las aberraciones cromosómicas