ISSN: 2168-958X
Rajagopal Chattopadhyaya, Himadri Biswas y Apurba Sarkar
Se han caracterizado y clonado muchos miembros de la familia de lectinas monocotiledóneas que se unen a la manosa, caracterizadas por su especificidad hacia la manosa. La mayoría de estas moléculas de lectinas contienen de 1 a 4 polipéptidos de aproximadamente 110 residuos cada uno. A partir de las estructuras cristalinas previamente resueltas de algunas de estas lectinas, en su mayoría de plantas no comestibles, se cree que estas lectinas poseen una estructura común de plegado β-prisma II. La principal proteína de almacenamiento del tubérculo de Colocasia esculenta es una lectina dietética ampliamente utilizada que se une a la manosa de las monocotiledóneas. Esta aglutinina de tubérculo contiene dos polipéptidos de 12,0 y 12,4 kDa por espectrometría de masas de tiempo de vuelo de ionización por desorción láser asistida por matriz. Por filtración en gel a pH 7,2, la lectina purificada tiene una forma α2β2 de masa molecular aparente de 48,2 kDa en solución pero a pH 3 , tiene el heterodimérico αβ forma. Los cristales de lectina se obtuvieron mediante el método de difusión de vapor de gota colgante a temperatura ambiente y los datos de difracción de rayos X de alta resolución se recopilaron utilizando una fuente de rayos X doméstica. Entre las estructuras cristalinas previamente resueltas de esta familia se encuentran las lectinas del ajo, la foca de Salomón, la campanilla blanca, el narciso y la campanilla española, pero se encontró que la secuencia de proteínas de la aglutinina del tubérculo Colocasia esculenta era la más cercana. a la de la lectina Remusatia vivipara que no tiene propiedad de unión a manosa simple. Usando el 2.4Å La estructura cristalina de la lectina Remusatia vivipara, la de Colocasia esculenta se ha resuelto mediante reemplazo molecular y posterior refinamiento cristalográfico y se tabulan y racionalizan las desviaciones cuadráticas medias entre varias lectinas. La unidad asimétrica en nuestra estructura cristalina de lectina contiene cuatro dominios β-prisma II o dos αβ heterodímeros, cada uno de los cuales forma un heterotetrámero α2β2 con una unidad relacionada con la simetría. La interfaz tetramérica obtenida de nuestra estructura cristalina se usa para explicar la conversión a dímeros en pH ácido. Se localizaron cinco iones de magnesio ordenados en la unidad asimétrica y se verificó la presencia de magnesio mediante espectroscopia de absorción atómica.