Clonación y transgénesis
Acceso abierto

abstracto

Construcción de proteína de fusión GFP-Neo funcional mediante la selección de una biblioteca de péptidos

Mingdong Liu y Jiayou Zhang

Casi todos los vectores retrovirales necesitan expresar más de una proteína. Una de las estrategias para expresar múltiples proteínas es construir una proteína de fusión que codifique dos genes a partir de un único marco de lectura. Dado que la interacción de dos genes de resistencia a proteínas estrechamente vinculadas. Esta biblioteca de péptidos se transformó luego en bacterias, y las bacterias transformadas se seleccionaron por su fluorescencia verde y su resistencia a los antibióticos. Se han seleccionado varias proteínas de fusión. Cuando estos genes fusionados se expresan mediante vectores retrovirales, las proteínas de fusión GFP-Neo también son funcionales en células eucariotas. La intensidad de fluorescencia de nuestras proteínas de fusión es mucho mayor que la de un clon de fusión GFP comercial, aunque sigue siendo menor que la GFP de tipo salvaje. El aislamiento de una proteína de fusión descrito aquí se puede modificar y utilizar para aislar otras proteínas de fusión, siempre que haya selecciones disponibles para sus funciones.