Revista de metabolismo de fármacos y toxicología
Acceso abierto
ISSN: 2157-7609
ISSN: 2157-7609
Joseph M Covey, Joel M Reid, Sarah A Buhrow, Mary Kuffel, Chad Walden, Holger Behrsing y Matthew M Ames
Antecedentes: la batracilina es un inhibidor heterocíclico de arilamina topoisomerasa con actividad anticancerígena preclínica. Se observaron marcadas diferencias entre especies en la sensibilidad a la toxicidad de la batracilina y se atribuyeron a la formación diferencial de N-acetilbatracilina por la N-acetiltransferasa. Un ensayo de fase I de batracilina en pacientes de cáncer con genotipos de acetilador lento identificó una toxicidad limitante de la dosis de cistitis hemorrágica. Para explorar más a fondo el metabolismo de la batracilina y la N-acetilbatracilina en todas las especies, se realizaron estudios detallados con preparaciones de hepatocitos y microsomales de hígado de humanos, ratas y perros. Métodos: se incubó batracilina o N-acetilbatracilina con microsomas y hepatocitos de hígado humano, de rata y de perro y con microsomas humanos y de rata que expresan CYP. Los sustratos y metabolitos se analizaron mediante HPLC con matriz de diodos, fluorescencia, radioquímica o detección espectrométrica de masas. Se midió la unión covalente de batracilina y N-acetilbatracilina radiomarcadas a proteína y ADN en microsomas de hígado de rata, humano y perro inducidos con 3-metilcolantreno, y con citocromos P450 humanos recombinantes. Resultados: En preparaciones microsomales, la pérdida de batracilina estuvo acompañada por la formación de un metabolito hidroxilado en microsomas hepáticos humanos y cinco metabolitos hidroxilados en microsomas hepáticos de rata. Se encontraron seis metabolitos de mono o dihidroxi-N-acetilbatracilina en incubaciones de este compuesto con microsomas de hígado de rata 3MC. Se identificaron sitios de hidroxilación para algunos de los metabolitos utilizando sustratos deuterados. La incubación con citocromos P450 recombinantes identificó a rCYP1A1, rCYP1A2, hCYP1A1 y hCYP1B1 como las principales isoformas de CYP que metabolizan la batracilina y la N-acetilbatracilina. También se identificaron conjugados de glucurónido de batracilina en incubaciones de hepatocitos. Se detectó la unión covalente a la proteína y al ADN dependiente de NADPH en todas las preparaciones de batracilina y en la mayoría de las preparaciones de N-acetilbatracilina evaluadas. Conclusiones: El metabolismo microsomal de batracilina y N-acetilbatracilina da como resultado múltiples productos hidroxilados (incluidas posibles hidroxilaminas) y conjugados de glutatión. La incubación de batracilina con hepatocitos resultó en la producción principalmente de glucurónidos y otros conjugados. No hubo una distinción clara en el metabolismo de la batracilina y la N-acetilbatracilina entre las especies que explicaría la toxicidad diferencial.