Enfermedades micobacterianas
Acceso abierto
ISSN: 2161-1068
ISSN: 2161-1068
Isabela Gama Sardella, Ana Carla de Paulo Mulinari, Leila de Souza Fonseca y Maria Helena Féres Saad
Los antígenos específicos (Ag) de Mycobacterium tuberculosis serían de gran valor en el desarrollo de pruebas de tuberculosis (TB), sin embargo, el reconocimiento heterogéneo humano de los epítopos de Ag puede resultar en una variación de la especificidad de la prueba. En este trabajo describimos la construcción de dos proteínas de fusión, basadas en dos péptidos de MPT-64 que alteran MT-10 Ag, F1-MT10.3 (1M-40S):CE15 (173G-187A):MT10.3 (41S -96) y F2- MT10.3 (1M-40S):MPT64 (91L-205A):MT10.3 (41S-96), y su potencial inmunorreactividad en sueros de TB. Estos genes de fusión se clonaron en un vector de expresión, se insertaron en E. coli y sus proteínas se expresaron y purificaron. Utilizando la técnica ELISA, se evaluaron proteínas fusionadas purificadas y antígenos completos individuales para IgA, IgM e IgG en sueros de individuos diagnosticados con tuberculosis pulmonar (TB) y controles con otras enfermedades pulmonares. La construcción F1 generó un nuevo péptido y F2 generó dos péptidos modificados en comparación con las proteínas completas individuales. En las pruebas de los sueros humanos de tuberculosis, las construcciones fueron reconocidas por todos los tipos de anticuerpos, pero los mejores resultados se obtuvieron para ELISA-IgA, que reconoció predominantemente F2 (66,7 %) y F1 (58,3 %), seguido de antígenos individuales completos MT10.3 ( 41,7%) y MPT64 (16,7%) manteniendo la mayor especificidad (95,5%), pasando hasta ahora desapercibida. La reactividad de IgG-F1 e IgM-F2 mostró una UAC más alta que la de MT10.2 y MPT64 completos. Los datos demostraron la viabilidad de las construcciones y la utilidad de la modificación de moléculas para obtener una potencial mejora de la reactividad inmunológica, lo que amerita una mayor caracterización inmunológica.