Revista de métodos de diagnóstico médico
Acceso abierto

abstracto

Aplicaciones clínicas de tecnologías moleculares en hematología

Esther Pui-Ting Lam, Charles Ming-Lok Chan, Nancy Bo-Yin Tsui1, Thomas Chi-Chuen Au, Kit-Fai Wong, Heong-Ting Wong, Ka-Yue Chiu, Lawrence Wing-Chi Chan, Benjamin Yat -Ming Yung y Sze-Chuen César Wong,

La rápida aparición de plataformas de diagnóstico molecular ha revolucionado los enfoques de diagnóstico en el laboratorio de hematología. La hibridación fluorescente in situ, la reacción en cadena de la polimerasa y la secuenciación del ADN son técnicas comunes utilizadas en los laboratorios clínicos de rutina para el diagnóstico de enfermedades hematológicas. Diferentes técnicas moleculares están indicadas en diferentes situaciones. Este artículo describe la utilidad de las técnicas moleculares comunes. La hibridación in situ con fluorescencia es específica para la detección de anomalías cromosómicas utilizando una sonda marcada con fluorescencia. La reacción en cadena de la polimerasa amplifica el ADN objetivo y la reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa inversa amplifica el ARN objetivo para el análisis del gen y su nivel de expresión. La reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real es muy sensible para la detección de enfermedad residual mínima en neoplasias malignas hemáticas. La reacción en cadena de la polimerasa gap se emplea a menudo para el diagnóstico de grandes deleciones, como en la alfa talasemia. La reacción en cadena de la polimerasa específica de alelo se usa comúnmente para la detección de polimorfismos de un solo nucleótido, que es común en la talasemia beta, la neoplasia mieloproliferativa y la leucemia aguda. La reacción en cadena de la polimerasa de desplazamiento inverso se puede emplear para la detección de grandes reordenamientos genéticos como los que se observan en la hemofilia A. Para enfermedades genéticamente complejas como la hemofilia A, que involucra una gran variedad de mutaciones en genes grandes , el análisis de fusión de alta resolución se puede utilizar para buscar mutaciones puntuales. Cualquier mutación sospechosa se confirma utilizando tecnologías posteriores a la PCR, como la secuenciación de ADN. Aunque los métodos de diagnóstico convencionales pueden proporcionar un análisis básico en la mayoría de los casos, las tecnologías moleculares generan información genética valiosa que puede refinar el diagnóstico, predecir mejor el pronóstico y facilitar el seguimiento de la enfermedad.