Revista de Proteómica y Bioinformática
Acceso abierto

abstracto

Sobreexpresión de CD109 en cáncer de páncreas identificada por superficie celular Captura de glicoproteínas

Randy S Haun, Chun-Yang Fan, Samuel G Mackintosh, Hong Zhao y Alan J Tackett

Antecedentes: el desarrollo de nuevas terapias dirigidas contra el cáncer y/o herramientas de diagnóstico depende de la comprensión de la expresión diferencial de objetivos moleculares entre tejidos normales y tumores. Muchos de estos objetivos potenciales son receptores de superficie celular; sin embargo, nuestro conocimiento de las proteínas de la superficie celular reguladas al alza en los tumores de páncreas es limitado, lo que impide el desarrollo de terapias dirigidas para el cáncer de páncreas. Para desarrollar nuevas herramientas diagnósticas y terapéuticas que se dirijan específicamente a los tumores pancreáticos, buscamos identificar proteínas de la superficie celular que puedan servir como posibles objetivos específicos del tumor.

Métodos: las glicoproteínas de membrana en las líneas celulares de cáncer de páncreas BxPC-3 se marcaron con el enlazador bifuncional biocitina hidrazida. Después de la digestión proteolítica, los glicopéptidos biotinilados se capturaron con perlas acopladas a estreptavidina y luego se liberaron mediante la escisión de endoglicosidasa mediada por PNGasaF y se identificaron mediante cromatografía líquida-espectrometría de masas en tándem (MS). Una proteína identificada por el procedimiento de captura de glicoproteína de la superficie celular, CD109, se evaluó mediante análisis western de lisados de líneas celulares de cáncer de páncreas y mediante inmunohistoquímica en secciones de adenocarcinoma ductal pancreático y tejidos pancreáticos no neoplásicos.

Resultados: el análisis MS/MS de los glucopéptidos capturados de las células BxPC-3 reveló 18 proteínas que se predijo o se sabe que están asociadas con la membrana plasmática, incluida la CD109, que no se ha informado en el cáncer de páncreas. El análisis Western de CD109 en lisados preparados a partir de líneas celulares de cáncer de páncreas reveló que se expresaba en 6 de 8 líneas celulares, con un alto nivel de expresión en células BxPC-3, MIAPaCa-2 y Panc-1. Los análisis inmunohistoquímicos de los tejidos pancreáticos humanos indican que CD109 se sobreexpresa significativamente en los tumores pancreáticos en comparación con el páncreas normal.

Conclusiones: la captura selectiva de glicopéptidos de la superficie de líneas celulares de cáncer de páncreas puede revelar nuevas glicoproteínas de superficie celular expresadas en adenocarcinomas ductales pancreáticos.