Revista de cromatografía y técnicas de separación
Acceso abierto
ISSN: 2157-7064
ISSN: 2157-7064
Ramesh Kumar K, Sneha Xiavour, Swarna Latha, Vijay Kumar y Sukumaran
Los estudios de nuestro experimento están relacionados con la unión de enzimas a anticuerpos. Esto implica la formación de un enlace covalente estable entre una enzima & anticuerpo. Utilizamos diferentes enzimas para estos estudios que están alteradas en la acción de unión. Enzimas que usamos, p. Peroxidasa de rábano picante (HRPO), ureasa o fosfatasa alcalina. Estudios de enzimas y anticuerpos monoclonales o policlonales específicos de antígeno en los que ni el sitio de combinación del antígeno ni el sitio activo de la enzima están funcionalmente alterados. La enzima más utilizada en la preparación del inmunorreactivo (el conjugado de anticuerpo-enzima) es el peróxido de rábano picante. Esta enzima es barata y se puede unir al inmunorreactivo por una variedad de métodos. Además, también están disponibles muchos sustratos cromogénicos para ello. Nuestros estudios experimentales sobre la conjugación de peroxidasa de rábano picante (HRPO) con anticuerpos (IgG antihumana) se llevarán a cabo mediante el método de oxidación con peryodato. Hemos preparado un conjugado de IgG-HRP antihumano en nuestro laboratorio. Esto se usará para ELISA y experimentos de transferencia Western y la IgG purificada de diferentes muestras de suero humano se usaría como antígeno en los experimentos anteriores. Este experimento se lleva a cabo en dos pasos diferentes mencionados como: Preparaciones de conjugado de peroxidasa de rábano picante-IgG anti-humana, Caracterización de IgG humana aislada.