Revista de glucómica y lipidómica
Acceso abierto
ISSN: 2153-0637
ISSN: 2153-0637
andras guttman
La caracterización completa de los restos de N-glicosilación de los productos biofarmacéuticos es de gran importancia, especialmente cuando las glucovariantes pueden afectar el efecto biológico. Más de la mitad de las proteínas terapéuticas de nueva generación son anticuerpos monoclonales, en los que los oligosacáridos unidos no solo afectan sus propiedades fisicoquímicas y su estabilidad, sino también su actividad de unión al receptor, la vida media circulante y, por último, pero no menos importante, su inmunogenicidad. Por lo tanto, las técnicas glicoanalíticas de alto rendimiento tienen una gran demanda para el análisis de N-glicosilación de anticuerpos terapéuticos, especialmente durante la selección de clones, el desarrollo del proceso y la liberación de lotes. El análisis de carbohidratos complejos es una tarea muy desafiante debido a la falta de su actividad de cromóforo/fluoróforo y, en muchos casos, grupos fácilmente ionizables, lo que requiere derivatización antes del análisis mediado por campos eléctricos. La caracterización completa de la N-glicosilación también puede requerir la secuenciación con pasos consecutivos de digestión con exoglicosidasa, seguidos de un análisis de electroforesis capilar. En esta presentación, se presentará el estado del arte de los métodos de separación de fases líquidas para la elucidación estructural integral de la N-glicosilación de proteínas, principalmente mediante electroforesis capilar y su combinación con espectrometría de masas (CESI-MS). Con la ayuda del campo emergente de la glicoinformática, se demostrará la asignación de la identidad de las estructuras de glucano separadas mediante el uso del software GUcal recientemente presentado.