Revista de Proteómica y Bioinformática
Acceso abierto

abstracto

Un método eficiente para la extracción de proteínas secretadas de un hongo filamentoso, Cryphonectria parasitica

Jinzi Wang, Fangzhen Wang, Jinjie Shang y Baoshan Chen

Se evaluaron tres métodos diferentes para la extracción de proteínas secretadas de un hongo filamentoso, Cryphonectria parasitica, cultivado en medio líquido. Las muestras de proteínas preparadas con cada método se sometieron a SDS-PAGE y electroforesis en gel bidimensional (2-DE). Se encontró que la ultrafiltración no era adecuada para la extracción de las proteínas secretadas. Las muestras de proteínas preparadas mediante tratamiento con cloroformo seguido de precipitación con sulfato de amonio fueron aceptables para la separación con 2-DE. El método de desecho modificado fue el mejor para extraer las proteínas secretadas con mayor rendimiento y mejor calidad. Se pudieron identificar unas 300 manchas de proteína en un gel 2-DE usando muestras de proteína preparadas con este método a partir de un cultivo de 3 días. El aislamiento exitoso de proteínas secretadas de alta calidad es la solicitud previa para el análisis del proteoma secretado por hongos. El nuevo método puede aplicarse a otros hongos filamentosos, en particular a los patógenos.