Bioquímica y Farmacología: Acceso abierto
Acceso abierto
ISSN: 2167-0501
ISSN: 2167-0501
Harkness Troy AA y Arnason Terra G
La medición de la hidrólisis de sacarosa a glucosa y fructosa en la levadura es valiosa para muchos aspectos de la biología de las células de levadura y el análisis metabólico, y se ha utilizado ampliamente para comprender la genética de la quinasa SNF1. Sin embargo, falta un método simple y rápido que describa cómo realizar este ensayo para nuevos usuarios. Aquí, revisamos varios métodos utilizados para medir la actividad de la invertasa. Nos enfocamos en un método basado en un ensayo colorimétrico que fue descrito por primera vez por Goldstein y Lampen en 1975. Nuestro informe no solo describe una aplicación simple y rápida de este método para medir la actividad enzimática de invertasa secretada de células enteras de levadura para nuevos usuarios, sino también establece tiempos optimizados para las condiciones del ensayo. El método utiliza un pequeño volumen de cultivo de levadura en el que todo el procedimiento se puede realizar en menos de una hora. Muy pocos informes ofrecen un método paso a paso que pueda usarse fácilmente sin un conocimiento previo del procedimiento, lo que proporciona el impulso para este informe. Las optimizaciones descritas en este informe permiten una mayor sensibilidad al comparar cambios sutiles.